2023年全國碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、隨著(zhù)緊湊型玉米品種的大面積種植,玉米栽培密度提高,氮肥用量增加,形成有利于玉米紋枯病發(fā)生的小氣候條件。玉米紋枯病已成為我國玉米主產(chǎn)區的一種重要病害,其危害日趨嚴重。東北地區是我國春玉米主產(chǎn)區,玉米紋枯病對該地區玉米的危害呈逐年加重的趨勢,本研究對該地區玉米紋枯病菌的融合群類(lèi)群進(jìn)行了系統鑒定并對其優(yōu)勢致病群AG1-IA進(jìn)行了遺傳多樣性分析,主要研究結果如下:
   1.自中國東北三省采集玉米紋枯病標本300余份,分離獲得286個(gè)絲

2、核菌菌株。融合群測定結果表明,這些菌株分別屬于多核絲核菌的AG1-IA、AG1-IB、AG1-IC、AG4-HG-I、AG4-HG-III、AG-5、WAG-Z群及雙核絲核菌的AG-Ba群。其中AG1-IA是優(yōu)勢致病群,占分離菌株總數的38.46%,其次是WAG-Z和AG-5群,分別占26.92%及24.83%。AG4-HG-III群菌株是國內首次從罹病玉米植株上分離得到。
   2.利用5.8S rDNA-ITS區序列分析方法

3、,對該地區玉米紋枯病菌不同融合群代表菌株的系統演化關(guān)系進(jìn)行了研究。結果表明,相同融合群(或亞群)的菌株,序列一致率達98-100%,而不同融合群(或亞群)菌株之間序列的一致率僅為72%-89%。說(shuō)明此基因序列可以對絲核菌不同融合群或亞群的菌株進(jìn)行有效區分和鑒定。依據本研究測得的31個(gè)代表菌株及10個(gè)源自GenBank且隸屬不同融合群的菌株所構建的系統發(fā)育樹(shù)可以看出,41個(gè)菌株可被劃分為3個(gè)大的分支,其中屬于立枯絲核菌(Rhizocson

4、ia solani)的6個(gè)不同融合亞群(AG4-HG-III、AG4-HG-I、AG-5、AG1-IC、AG1-IB和AG1-IA)的29個(gè)菌株構成第一個(gè)分支;第二個(gè)分支由屬于雙核絲核菌AG-Ba群的5個(gè)菌株構成;屬于多核絲核菌WAG-Z群的YR-13、YR-18和YR-69等7個(gè)菌株構成第三個(gè)分支。進(jìn)一步分析三個(gè)分支間的親緣關(guān)系發(fā)現,屬于雙核絲核菌AG-Ba群的菌株與屬于立枯絲核菌不同融合群菌株間的親緣關(guān)系更近,而屬于WAG-Z群的不

5、同菌株與隸屬立枯絲核菌及雙核絲核菌不同融合群菌株間親緣關(guān)系相對較遠。
   3.利用正交試驗設計方法來(lái)優(yōu)化立枯絲核菌AG1-IA群菌株的ISSR反應體系。利用引物UBC809對體系中Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶和引物的濃度等4個(gè)因素采用L9(34)正交表對ISSR反應體系進(jìn)行了優(yōu)化。確定了ISSR擴增的優(yōu)化體系為:25μL的PCR體系中含有Mg2+2.2 mmol·L-1、dNTPs 0.15 mmol·L-1、T

6、aq DNA聚合酶0.5 U、引物0.32μmol·L-1、DNA模板0.5μL。
   4.利用ISSR-PCR技術(shù)對采自吉林、遼寧、山東和江蘇等不同地域的中國玉米主產(chǎn)省份的28個(gè)AG1-IA群菌株的遺傳多樣性進(jìn)行了分析。從35個(gè)供試引物中篩選出11個(gè)多態(tài)性明顯、條帶清晰、反應穩定的引物,進(jìn)行ISSR-PCR擴增,共擴增出97條譜帶,其中特征性條帶(多態(tài)性位點(diǎn))為74條,占總條帶數的76.3%。依據擴增結果,利用UPGMA法,

7、構建了其樹(shù)狀聚類(lèi)圖譜。聚類(lèi)分析結果表明,供試的28個(gè)菌株的遺傳相似系數在0.70~0.90,在0.73水平上,28個(gè)菌株可分為4個(gè)ISSR組(IG)。IG1是來(lái)自江蘇的1個(gè)菌株。IG2包括來(lái)自吉林、遼寧的5個(gè)菌株。IG3包括遼寧的1個(gè)菌株和江蘇的1個(gè)菌株。IG4包括剩余的20個(gè)菌株,在0.77水平上,此組又可以進(jìn)一步分為4個(gè)亞組,其中第一個(gè)亞組包括10個(gè)菌株,其中有來(lái)自吉林、遼寧省的7個(gè)和來(lái)自山東的3個(gè)菌株;第二個(gè)亞組包括來(lái)自山東的3個(gè)

8、菌株;第三個(gè)亞組包括遼寧的1個(gè)菌株和山東的1個(gè)菌株;第四個(gè)亞組是來(lái)自江蘇省的5個(gè)菌株。上述結果表明,來(lái)自不同地域的AG1-IA群菌株既存在一定程度的遺傳分化現象也存在較大程度的相似性,來(lái)自吉林和遼寧的菌株其遺傳相似度更高,來(lái)自東北地區的菌株與山東的菌株也存在較高的相似度,而與來(lái)自江蘇的菌株間的相似度明顯降低。說(shuō)明AG1-IA融合群菌株的遺傳分化與大范圍的地理位置差異存在較密切的相關(guān)性。
   5.利用ISSR-PCR方法對28個(gè)

9、致病力存在差異的AG1-IA群菌株的遺傳分化現狀進(jìn)行了測定。從35個(gè)供試引物中篩選出11個(gè)多態(tài)性明顯、條帶清晰、反應穩定的引物,進(jìn)行ISSR-PCR擴增,共擴增出79條譜帶,其中特征性條帶(多態(tài)性位點(diǎn))為55條,占總條帶數的69.62%。依據擴增結果,利用UPGMA法,構建了其樹(shù)狀聚類(lèi)圖譜。聚類(lèi)結果表明,供試的28個(gè)菌株的遺傳相似系數在0.72~0.95,在0.75水平上,28個(gè)菌株可分為3個(gè)ISSR組:IG1組包括7個(gè)強致病力的菌株;

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