一株乙羧氟草醚高效降解菌的分離鑒定、降解特性及其應(yīng)用研究.pdf

1、本研究從生產(chǎn)乙羧氟草醚的農(nóng)藥廠污水處理池的污泥中，分離得到一株能以乙羧氟草醚為唯一碳源生長的高效降解菌株，命名為MBWY-1。根據(jù)其表型特征、生理生化特性，結(jié)合菌株的16S rRNA基因序列同源性比較，最終鑒定菌株MBWY-1為分枝桿菌屬（Mycobacterium phocaicum）。
　　 菌株MBWY-1在LB液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)17h時，菌株生長最快，在19h后逐漸進入穩(wěn)定生長期;菌株的最適生長溫度和pH分別為30℃，6.

2、5～7.0;裝液量越多，營養(yǎng)越充足，菌株生長越旺盛，溶解氧越多，對菌株的生長越有利;NaCl濃度對菌株生長的影響很大，隨著NaCl濃度增大，菌株生長逐漸受到抑制，當達到4.0％時，菌株在高鹽的脅迫下，生長幾乎停滯;菌株MBWY-1能在試驗中大多的有機碳源中生長，其中在木糖、果糖和葡萄糖的LB培養(yǎng)基中生長較好，但是對無機碳源碳酸鉀和碳酸氫鈉則幾乎不利用;菌株對試驗中所有形式氮源利用率都比較高，其中對有機氮源蛋白胨利用率最高;菌株對氯霉素、

3、羧芐青霉素、羥氨芐青霉素均有抗性，對卡那霉素沒有抗性，對氨芐青霉素、鏈霉素、慶大霉素較為敏感。
　　 菌株在培養(yǎng)基中培養(yǎng)32h后對100 mg/L的乙羧氟草醚降解效果可達51.9％，96h后達到91.6％;培養(yǎng)液中的菌株光密度隨著乙羧氟草醚的降解相應(yīng)的逐漸上升，表明菌株以乙羧氟草醚為唯一碳源進行生長。菌株MBWY-1在30℃、pH6.0～7.0條件下降解效果最好;溶解氧量越多降解效果越好。菌株接種量越大，乙羧氟草醚的降解速率和降

4、解率越高。乙羧氟草醚的起始濃度越低，越容易被菌株利用，降解較快;隨著初始濃度的提高，菌株將其完全降解的時間也不斷增加。所有試驗重金屬（除Ba2+、Cu2+、Ag+）濃度為0.1mM/L時，對菌株降解乙羧氟草醚影響均比較小，當濃度達到10 mM/L時，都會在不同程度上抑制乙羧氟草醚的降解，其中高濃度的Cu2+、Ag+、Co2+對菌株的降解影響最大。
　　 土壤空白添加濃度為1、5、20mg/Kg時，乙羧氟草醚在土壤中平均添加回收率

5、較高，在87.8％～92.3％之間，土壤回收的相對標準偏差在1.76％～4.41％之間。投加外源降解菌MBWY-1可顯著提高土壤中乙羧氟草醚的降解率，土著微生物參與乙羧氟草醚的微生物降解;土著微生物與外源投加的降解菌以協(xié)同作用的方式降解乙羧氟草醚，提高了土壤中乙羧氟草醚的降解速率。
　　 通過質(zhì)譜檢測出了乙羧氟草醚的5種降解產(chǎn)物分別為:{5-[2-氯-4-（三氟甲基）苯氧基]-2-硝基苯甲?；鶀羥基乙酸，5-[2-氯-4-（三氟

6、甲基）苯氧基]-2-硝基苯甲酸，即三氟羧草醚，5-[2-氯-4-（三氟甲基）苯氧基]-2-硝基，5-[2-氯-4-（三氟甲基）苯氧基]-2-羥基，3-氯-4-羥基三氟甲苯。同時確定了其降解途徑:苯環(huán)上鏈烷基的第一個和第二個酯鍵相繼水解斷裂生成三氟羧草醚，然后三氟羧草醚脫去羧基，進一步再將硝基還原為羥基生成5-[2-氯-4-（三氟甲基）苯氧基]-2-羥基，最后醚鍵斷裂生成兩分子的苯環(huán)類衍生物——3-氯-4-羥基三氟甲苯和對苯二酚。菌株降解