一系列吡唑啉類化合物的設(shè)計(jì)、合成及其抗腫瘤生物活性的研究.pdf

1、癌癥是世界范圍的一個(gè)主要公共健康問(wèn)題。癌癥治療的嚴(yán)重的不良反應(yīng)和副作用嚴(yán)重的影響著病人的生活質(zhì)量。迄今為止，人類尚未能完全攻克癌癥。目前，對(duì)惡性腫瘤主要有三種治療手段，分別為外科手術(shù)、化學(xué)治療和放射治療。應(yīng)用以細(xì)胞毒為主的抗腫瘤藥進(jìn)行化療仍然是腫瘤綜合治療中的重要手段。吡唑啉類化合物是一類具有廣泛生物活性的物質(zhì)，其中就有抗腫瘤活性，抗炎活性，殺菌和抗病毒活性，殺蟲作用以及降血壓等作用。作為一個(gè)藥物活性載體和藥物的基本骨架結(jié)構(gòu)，科學(xué)家們不

2、斷對(duì)其進(jìn)行深入研究，并改造和修飾其化學(xué)結(jié)構(gòu)，力求找到符合用藥要求的新的化學(xué)結(jié)構(gòu)，開發(fā)出新的藥物。如今臨床上使用的抗炎藥塞來(lái)昔布就屬于此類的結(jié)構(gòu)；對(duì)于其抗菌、殺蟲作用的研究，也取得不小的成就，已經(jīng)被成功開發(fā)且在市面上銷售的商品很多了，比如由日本三共化學(xué)公司開發(fā)的殺蟲劑吡唑特和德國(guó)拜耳公司開發(fā)的銳勁特，德國(guó)巴斯夫公司開發(fā)的殺菌劑吡唑醚菌酯等。但目前臨床上使用的抗腫瘤藥物中，吡唑啉類的藥物暫時(shí)還比較少，由輝瑞公司開發(fā)的酪氨酸激酶抑制劑阿昔替尼

3、（AG013736）是其中一個(gè)代表；很多具有吡唑啉結(jié)構(gòu)的藥物正在臨床實(shí)驗(yàn)階段，比如現(xiàn)在還處于臨床二期實(shí)驗(yàn)的DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑9-甲氧基吡唑啉吖啶（PZA），處于臨床三期實(shí)驗(yàn)的p38 MAPK抑制劑達(dá)馬莫德（BIRB-796）等。
　　本研究設(shè)計(jì)合成了含有不同性質(zhì)取代基的吡唑啉衍生物，通過(guò)用人肝癌細(xì)胞（HepG-2）和大鼠原代肝細(xì)胞的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)母核結(jié)構(gòu)上不同取代基對(duì)其抗腫瘤活性的影響，篩選出效果最優(yōu)、具有良好活性的化合物，

4、并為后續(xù)的化合物設(shè)計(jì)和研究提供理論參考依據(jù)。主要內(nèi)容包括：⑴以含不同取代基的苯甲醛和含不同取代基的苯乙酮為原料，通過(guò) Claissen-Schmidt縮合反應(yīng)合成不同的查爾酮類衍生物；⑵查爾酮類衍生物和水合肼或苯肼反應(yīng)，得到1位氮原子上沒有取代的吡唑啉化合物或1位氮原子上含苯基取代的吡唑啉化合物；⑶將1位氮原子上沒有取代的吡唑啉化合物與含不同取代基的苯磺酰氯或苯甲酰氯在吡啶催化下反應(yīng)，得到1位氮原子含不同取代基的吡唑啉衍生物；⑷采用MT

5、T（噻唑藍(lán)）法和 MTS法測(cè)定各吡唑啉化合物的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)，并篩選出活性較好的目標(biāo)化合物；⑸細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)目標(biāo)化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞 DNA合成過(guò)程的抑制情況,明確目標(biāo)化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞DNA合成周期的抑制階段；⑹用Annexin V-FITC和碘化丙啶染色液（PI）對(duì)貼壁細(xì)胞HepG-2進(jìn)行原位熒光顯微鏡檢測(cè)；觀察陰性對(duì)照組和給藥的實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的染色情況；⑺采用FITC-PI細(xì)胞雙染實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞處理后上機(jī)（BD-C6流式細(xì)胞儀）檢測(cè)，初步探索