P38MAPK信號通路在肢體缺血預處理腦保護中的作用.pdf

1、目的：
　　應用大鼠大腦中動脈缺血再灌注模型研究無創(chuàng)性遠端肢體缺血預處理（ romote limb ischemic preconditioning,RLIP）對大鼠腦缺血再灌注損傷的作用，探討RLIP是否通過降低p38MAPK信號通路的活性減輕神經(jīng)細胞凋亡發(fā)揮腦保護的作用。
　　方法：
　　36只健康雄性SD大鼠，體重200-250g，鼠齡3-4個月，隨機分成3組（n=12）：假手術組（Sham組）、缺血再灌注組（I

2、/R組）、無創(chuàng)性遠端肢體缺血預處理組（RLIP組）。①Sham組：只分離大鼠右側的頸總動脈（CCA）、頸內動脈（ICA）和頸外動脈（ECA），不插入線栓和結扎血管，縫合傷口后觀察24h。②I/R組：參照Longa的線栓法制作右側大腦中動脈缺血再灌注（MCAO）模型，缺血2h，再灌注24h。③RLIP組：在大鼠右后肢根部用自制的改良血壓袖帶施行缺血預處理，缺血5min，再灌注5min，共3個循環(huán)，遠端肢體缺血預處理后即刻行大鼠右側大腦中動

3、脈阻塞再灌注，余步驟同前。三組大鼠均再灌注24h后行神經(jīng)功能缺陷評分（ Neurologic deficit scores，NDS）；用TTC法測定腦梗死容積；HE染色觀察大鼠海馬CA1區(qū)組織細胞的形態(tài)；免疫組織化學法檢測海馬CA1區(qū)P-p38MAPK蛋白、Caspase8蛋白及Caspase3蛋白的表達。
　　結果：
　?、偕窠?jīng)功能缺陷評分：Sham組無神經(jīng)功能缺陷；與I/R組相比，RLIP組評分降低，但兩組評分中位數(shù)相同

4、。②TTC染色：Sham組無腦梗死，與I/R組相比，RLIP組腦梗死容積顯著減小，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。③HE染色：Sham組海馬CA1區(qū)椎體細胞數(shù)量和形態(tài)正常，排列整齊、致密，為2-3層，染色呈淺藍色，間質無水腫。I/R組椎體細胞數(shù)量明顯減少，細胞體積縮小、變形，細胞核碎裂、溶解、染色加深，間質水腫嚴重。與I/R組比較，RLIP組海馬CA1區(qū)椎體細胞數(shù)目較多且形態(tài)較為完整，層次較清晰，間質水腫明顯減輕。④免疫組織化學結果顯