東祁連山高寒草地優(yōu)勢(shì)植物內(nèi)生細(xì)菌多樣性研究.pdf

1、甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文東祁連山高寒草地優(yōu)勢(shì)植物內(nèi)生細(xì)菌多樣性研究姓名：李振東申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：草地生物多樣性指導(dǎo)教師：陳秀蓉20100601甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)博十學(xué)位論文R A 8 在未滅菌土壤中的解磷量為1 1 5 ．5 3 m g ／L ，在滅菌土壤中的解磷量為7 7 ．6 0m g ／L 。R A 8 可使玉米的株高和株重顯著增加，對(duì)玉米的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用。對(duì)分泌I A A 能力最強(qiáng)菌株L Z H A 4 和分解纖維素能力最強(qiáng)菌株

2、X 5 的培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化，結(jié)果，L Z H A 4 在K i n g + 葡萄糖6 9 ／L + 色氨酸0 ．1 9 ／L 培養(yǎng)基中分泌I A A 量最大，為1 2 9 ．6 8m g ／L ，在K i n g + 葡萄糖6 9 ／L 培養(yǎng)基中分泌I A A 量為1 1 8 ．9 4 m g ／L ，兩者沒(méi)有顯著差異，考慮到成本因素，L Z H A 4 分泌I A A 的最佳培養(yǎng)基為K i n g + 葡萄糖6 9 ／L 。菌株X

3、5 產(chǎn)纖維素酶的最佳培養(yǎng)基為蛋白胨和酵母粉各5 9 ／L 、羧甲基纖維素鈉5 9 ／L 、p H 值為8 ．5 ，培養(yǎng)溫度為2 0 “ C 。在該條件下測(cè)得菌株X 5 產(chǎn)生的纖維素酶的酶活性為0 ．8 6 2 U ，是優(yōu)化前的酶活性( O ．4 5 6 U ) 的1 ．8 9 倍。2 、可培養(yǎng)內(nèi)生細(xì)菌遺傳多樣性研究研究獲得的1 0 2 株細(xì)菌的1 6 S r D N A 基因序列，已在G e n B a n k 中登錄，并獲得了菌株A

4、z o t o b a c t e rc h r o o c o c c u m1 ．1 7 8 和B a c i l l u s s p ．( Z 7 、Z 1 9 ) 、A c i n e t o b a c t e r s p ．( Z 2 1 ) 、L y s i n i b a c i l l u ss p h a e r i c u s ( Z 2 2 ) 的n ／f n 基因序列，亦在G e n B a n k 中登錄。根

5、據(jù)1 6 S r D N A 序列分析，芽孢桿菌屬( B a c i l l u s ) 細(xì)菌有5 7 株，占已鑒定內(nèi)生菌的5 5 ．9 ％，為優(yōu)勢(shì)菌群；S p h i n g o p y x i s 屬有7 株，占6 ．9 ％，沙雷氏菌屬( S e r r a t i a ) 有4株，占3 ．9 ％，不動(dòng)桿細(xì)菌屬( A c i n e t o b a c t e r ) 和L y s i n i b a c i l l u s 各有3

6、 株，占2 ．9 ％；節(jié)細(xì)菌屬( A r t h r o b a c t e r ) 、短小桿菌屬( C u r t o b a c t e r i u m ) 、假單胞菌屬( P s e u d o m o n a s ) 、芽孢八疊球菌屬( S p o r o s a r c i n a ) 、葡萄球菌屬( S t a p h y l o c o c c u s ) 、土壤桿菌屬( A g r o b a c t e r i u m

7、 ) 、寡養(yǎng)單胞菌屬( S t e n o t r o p h o m o n a s ) 、貪食菌屬( V a r i o v o r a x ) 分別有2 株，各占2 ％：鞘脂菌屬( S p h i n g o b i u m ) 、鞘脂單胞菌屬( S p h i n g o m o n a s ) 、微小桿菌屬( E x i g u o b a c t e r i u m ) 、考克氏菌屬( K o c u r i a ) 、微球

8、菌屬( M i c r o c o c c u s ) 、P l a n o m i c r o b i u m 、土地桿菌屬( P e d o b a c t e r ) 、副球菌屬( P a r a c o c c u s ) 、葉桿菌屬( P h y l l o b a c t e r i u m ) 、類芽胞桿菌( P a e n i b a c i l l u s ) 、S p h i n g o m o n a d a c

9、e a e 、原小單孢菌屬( P r o m i c r o m o n o s p o r a ) 各僅有1 株，占1 ％。共2 4 屬，其中P a r a c o c c u s ( R A 8 ) 、S p h i n g o b i u m ( Z A 7 ) 、S p h i n g o p y x i s ( Q C 2 、Q C 9 、R A 2 、R B 、R B 3 、R C l 、Z D 2 4 ) 、L y s i

10、 n i b a c i l l u s ( X 5 、Z D l 6 、Z 2 2 ) 和P l a n o m i c r o b i u m ( Q D 9 ) 5 個(gè)屬的1 3 個(gè)菌系的植物內(nèi)生細(xì)菌系首次報(bào)道。說(shuō)明高寒植物可培養(yǎng)內(nèi)生細(xì)菌具有豐富的遺傳多樣性。3 、各高寒植物可培養(yǎng)內(nèi)生細(xì)菌群落分布多樣性從5 種高寒植物可培養(yǎng)內(nèi)生細(xì)菌種類特征看，有a - p r o t e o b a c t e r i a 、p - p r o