沒食子物質基礎及其主要活性成分的藥代動力學研究.pdf

1、目的:
　　沒食子（Turkish galls）具有固澀、收斂、燥濕、止血及消炎等作用，是消化系統(tǒng)及牙科疾病的維吾爾族傳統(tǒng)藥物，也是新疆維吾爾自治區(qū)地方醫(yī)院醫(yī)院制劑潰結安的單味原料藥，用于治療潰瘍性結腸炎有良好的效果。近年來，潰瘍性結腸炎疾病的患病人數(shù)呈現(xiàn)上升趨勢，而目前市場上用于治療潰瘍性結腸炎的藥物種類少，并且藥物的副作用大。然而，通過臨床試驗，新疆維吾爾傳統(tǒng)藥物西依帕潰結安，不僅保證了治療效果，并且副作用較小，而備受矚目。但

2、是目前關于潰結安的單味原料藥沒食子的國內外研究報道的文獻極少，缺乏深入系統(tǒng)地研究，不利于沒食子的進一步開發(fā)與利用。本課題擬對沒食子藥材進行化學成分分析、血漿和尿液中代謝物鑒定分析以及對其主要活性成分沒食子酸、沒食子酸甲酯和1，3，6-三-O-沒食子?；?β-D-葡萄糖進行藥代動力學研究，期望豐富沒食子藥材的藥效物質基礎研究，為全面、系統(tǒng)地控制沒食子藥材的質量提供數(shù)據(jù)基礎，并且了解其活性成分在大鼠體內的藥代動力學特性，為沒食子的深入開發(fā)、

3、研究以及臨床合理用藥提供數(shù)據(jù)支持。
　　方法:
　　1.沒食子藥材化學成分的定性分析
　　采用液相色譜-電噴霧電離-離子阱-飛行時間質譜法(High-performance liquidchromatography-electrospray ionization-ion trap-time-of-flight-tandem massspectrometry，HPLC-ESI-IT-TOF-MS/MS）對沒食子化學成分進

4、行定性分析，通過對各個色譜峰的質譜數(shù)據(jù)進行解析，對比已知化合物的裂解規(guī)律，綜合保留時間、紫外數(shù)據(jù)、質譜數(shù)據(jù)及參考文獻報道數(shù)據(jù)對各個色譜峰進行結構鑒定。
　　2.沒食子在血漿和尿液中的代謝物成分分析
　　運用HPLC-ESI-IT-TOF-MS/MS法對血漿和尿液中的代謝物進行定性分析，經(jīng)過對每個化合物的質譜信息進行解析，參考已知物質的斷裂規(guī)律，并綜合考慮保留時間、質譜數(shù)據(jù)以及參考文獻的報道對各個物質進行鑒定。
　　3.

5、沒食子中主要活性成分沒食子酸、沒食子酸甲酯和1，3，6-三-O-沒食子?；?β-D-葡萄糖的藥代動力學研究
　　運用高靈敏度的液質聯(lián)用技術，建立能夠同時測定大鼠血漿中沒食子酸、沒食子酸甲酯和1，3，6-三-O-沒食子酰基-β-D-葡萄糖的LC-MS/MS法，并將其應用于沒食子中主要活性成分的藥代動力學研究。
　　結果:
　　1.沒食子藥材化學成分的定性分析
　　HPLC-ESI-IT-TOF-MS/MS定性分析，

6、從沒食子提取物中共鑒定得到21個化合物，分別為4個酚酸類、15個沒食子鞣質類化合物以及2個其他類化合物，其中有13個化合物為首次從沒食子中發(fā)現(xiàn)。
　　2.沒食子在血漿和尿液中的代謝物成分分析
　　通過HPLC-ESI-IT-TOF-MS/MS定性分析，從沒食子灌胃給藥大鼠后，在大鼠血漿和尿液中共鑒定得到22個化合物，包括沒食子酸類、雙沒食子酸類、Benzoic acid,3,5-dihydroxy-4-[(3,4,5-tri

7、hydroxybenzoyl) oxy]-,methyl ester以及其他類化合物，其中有21個化合物為首次從沒食子的代謝物中發(fā)現(xiàn)。
　　3.沒食子中主要成分沒食子酸、沒食子酸甲酯和1，3，6-三-O-沒食子?；?β-D-葡萄糖的藥代動力學研究
　　本實驗首次建立一個同時測定大鼠血漿中沒食子酸、沒食子酸甲酯和1，3，6-三-O-沒食子?；?β-D-葡萄糖的LC-MS/MS法。該方法的方法學考察均符合要求，且靈敏、選擇性好、

8、樣品處理方法簡便、分析時間短，成功應用于沒食子灌胃給藥后大鼠血漿中沒食子酸、沒食子酸甲酯和1，3，6-三-O-沒食子?；?β-D-葡萄糖的藥代動力學研究。大鼠灌胃給予沒食子提取液后，沒食子酸、沒食子酸甲酯和1，3，6-三-O-沒食子?；?β-D-葡萄糖均吸收迅速、消除緩慢。沒食子酸、沒食子酸甲酯和1，3，6-三-O-沒食子?；?β-D-葡萄糖的達峰濃度Cmax和藥時曲線下面積AUC0→t分別為32.5±41.51μg/mL和97.12±

9、76.78μg.h/mL，1039.88±689.88μg/mL和3822.43±1855.13μg·h/mL,1.68±1.51μg/mL和6.4±4.22μg·h/mL。
　　結論:
　　本課題首次建立一個HPLC-ESI-IT-TOF-MS/MS法對沒食子中化學成分進行定性分析，為全面、系統(tǒng)地控制沒食子藥材及其醫(yī)院制劑的質量提供了一個有效的新方法;首次報道沒食子中三個主要活性成分沒食子酸、沒食子酸甲酯和1，3，6-三-