ERα46在甲狀腺乳頭狀癌中的作用及機制研究.pdf

1、目的:
　　探索雌激素受體ERα46在甲狀腺乳頭狀癌中的作用及分子機制。
　　方法:
　　Western blot檢測 ERα46/ERα66在甲狀腺乳頭狀癌BCPAP細胞及正常甲狀腺細胞Nthy-ori3-1中的表達。構(gòu)建 ERα46真核表達載體轉(zhuǎn)染至BCPAP細胞，Western blot檢測ERα46/ERα66表達。提取轉(zhuǎn)染細胞總RNA,反轉(zhuǎn)錄并用實時定量PCR（RT-PCR）檢測細胞中c-fos和cyclin

2、 D1 mRNA的表達情況。流式細胞技術(shù)檢測ERα46過表達的細胞周期分布及細胞凋亡。細胞計數(shù)法檢測 ERα46過表達后BCPAP細胞的增殖情況。RT-PCR檢測miRNA21、PDCD4和PTEN的表達，Western blot檢測PDCD4和PTEN蛋白的表達。
　　結(jié)果：
　　ERα46/ERα66比率在甲狀腺乳頭狀癌BCPAP細胞中較甲狀腺正常細胞下調(diào)（P＜0.05）。ERα46過表達后ERα46/ERα66比率在B

3、CPAP細胞中上調(diào)，抑制雌激素誘導(dǎo)的BCPAP細胞中c-fos和cyclin D1的mRNA表達（P＜0.05），抑制了雌激素誘導(dǎo)的BCPAP細胞周期移行（P＜0.05），抑制雌激素誘導(dǎo)的BCPAP細胞增殖（P＜0.05）。ERα46過表達促進雌激素誘導(dǎo)的甲狀腺乳頭狀癌細胞凋亡。ERα46過表達細胞中miRNA21的表達明顯降低（P＜0.05）且雌激素誘導(dǎo)了miRNA21表達水平的進一步降低（P＜0.05）。ERα46過表達細胞中 PD