促紅細(xì)胞生成素對(duì)慢性心力衰竭大鼠心肌細(xì)胞的保護(hù)作用及對(duì)AKT-ERK蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　觀察促紅細(xì)胞生成素（EPO）對(duì)慢性心力衰竭（CHF）大鼠心功能的保護(hù)作用及其作用機(jī)制，為臨床治療提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　將30只成年雄性SD大鼠采用隨機(jī)數(shù)字法分為2組，模型（Model）組（n=24）和假手術(shù)（Sham）組（n=6）；模型組采用腹主動(dòng)脈縮窄術(shù)建立CHF模型，Sham組手術(shù)過(guò)程同Model組，但未予以腹主動(dòng)脈縮窄處理。術(shù)后8周末Sham組存活6只，Model組存活16只，行心臟彩超檢查

2、后再將再M(fèi)odel組隨機(jī)分為EPO組與對(duì)照（Control）組各8只。EPO組予以3000 U/kg EPO腹腔注射，3次/周，連續(xù)4周；Sham組、Control組腹腔注射等量的生理鹽水。分別在術(shù)后4周、8周、12周（即給藥4周）對(duì)全部大鼠行心臟彩超檢查，測(cè)量心率（HR）、收縮末期左心室后壁厚度（LVPWs）、舒張末期左心室后壁厚度（LVPWd）、左心室收縮末期內(nèi)徑（ LVDs）、左心室舒張末期內(nèi)徑（ LVDd）、左室射血分?jǐn)?shù)（LVE

3、F）、收縮末期室間隔厚度（IVSs）、舒張末期室間隔厚度（IVSd）、收縮末容量（ESV）、舒張末容積（EDV）、心輸出量（CO）等指標(biāo)。第12周末全部大鼠禁食24 h后處死，用光學(xué)顯微鏡觀察心肌組織細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)；采用TUNEL染色檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡并計(jì)算凋亡指數(shù)（AI）；采用酶聯(lián)免疫（ELISA）方法檢測(cè)各組大鼠心肌組織炎癥介質(zhì)IL-1、TNF-α的含量；運(yùn)用Western blot法檢測(cè)心肌組織AKT/P-AKT及ERK/P-ERK蛋

4、白表達(dá)變化。
　　結(jié)果:
　　1.超聲心動(dòng)圖結(jié)果：Model組建模4周后出現(xiàn)心室肥厚，8周后出現(xiàn)心力衰竭；予以EPO干預(yù)4周后較Control組LVEF明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）， IVSs、LVPWs、IVSd、LVPWd明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　2. HE染色結(jié)果：Sham組大鼠心肌細(xì)胞排列整齊、緊密，Control組細(xì)胞排列紊亂，有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、聚集。EPO組心肌間質(zhì)水腫及

5、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、聚集均較Control組減輕。
　　3. TUNEL染色細(xì)胞凋亡結(jié)果：Control組可見(jiàn)大量染成棕色的凋亡細(xì)胞核。EPO組凋亡細(xì)胞核數(shù)目Control組明顯減少。Control組AI較Sham組顯著增加，EPO組AI較Control組顯著降低（P<0.01），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4. Western blot檢測(cè)結(jié)果：EPO組心肌組織p-AKT/AKT及p-ERK/ERK OD值較Control組明顯升高