血紅素加氧酶-1對(duì)體外循環(huán)肺損傷作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：觀察鈷原卟啉誘導(dǎo)肺組織HO-1表達(dá)在大鼠體外循環(huán)肺損傷中發(fā)揮的具體作用，并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行分析。
　　方法：Wistar大鼠144只,雄性，隨機(jī)分為3組：A組（對(duì)照組）、B組（鈷原卟啉,CoPP）、C組[鈷原卟啉（CoPP）+鋅原卟啉（ZnPP）]。建立改良大鼠體外循環(huán)肺損傷模型。A組大鼠腹腔注射生理鹽水（制模前24h）；B組腹腔注射CoPP(5mg/kg)；C組腹腔注射CoPP(5mg/kg)和ZnPP(5mg/kg)。制

2、模成功后采用斷頸法分別于體外循環(huán)前(T0)、體外循環(huán)結(jié)束即刻(T1)、體外循環(huán)后2小時(shí)(T2)、6小時(shí)(T3)、12小時(shí)(T4)、24小時(shí)(T5)將大鼠處死，每次8只。取肺組織檢測(cè)相應(yīng)的指標(biāo)。取部分左肺組織檢測(cè)濕/干重（W/D）比。用多聚甲醛來(lái)固定部分右肺組織，然后用石蠟包埋,以用于HE染色，HO-1、Bcl-2蛋白表達(dá)的免疫組化方法測(cè)定以及TUNEL檢測(cè)細(xì)胞凋亡。剩余肺組織置于液氮中凍存?zhèn)溆?，用于檢測(cè)肺組織勻漿膽紅素的含量；化學(xué)法測(cè)定

3、超氧化物岐化酶（SOD）的活性、丙二醛（MDA）含量以及髓過(guò)氧化物酶（MPO）、總抗氧化能力(TAOC)的活性；酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法檢測(cè)TNF-α表達(dá)。
　　結(jié)果：B組大鼠肺組織中HO-1蛋白的表達(dá)在體外循環(huán)（CPB）開(kāi)始前后均有明顯增加，其活性測(cè)定結(jié)果與蛋白表達(dá)結(jié)果一致，在各時(shí)間點(diǎn)均強(qiáng)于A組和C組（P<0.05）。各組大鼠肺組織細(xì)胞Bcl-2蛋白的表達(dá)在體外循環(huán)前無(wú)明顯差異（P>0.05），CPB后Bcl-2蛋白表達(dá)逐漸

4、下調(diào)。B組大鼠肺組織Bcl-2蛋白的表達(dá)在體外循環(huán)后各時(shí)間點(diǎn)均高于A組和C組（P<0.05）。各組大鼠肺組織細(xì)胞凋亡指數(shù)（AI）在CPB前無(wú)顯著差異，CPB后AI逐漸增加，到T2點(diǎn)增加最明顯，之后逐漸下降。B組大鼠肺組織AI在體外循環(huán)后各時(shí)間點(diǎn)均低于A組和C組（P<0.05）。各組大鼠肺組織SOD、MDA、MPO、TAOC在體外循環(huán)前無(wú)明顯差異（P>0.05）。各組SOD活性及TAOC在CPB后逐漸下降。B組在體外循環(huán)后各時(shí)間點(diǎn)均高于A

5、組和C組（P<0.05）。MDA含量及MPO活性在CPB后逐漸增加，B組在CPB后各時(shí)間點(diǎn)均低于A組和C組（P<0.05）。B組大鼠肺組織TNF-α的含量在CPB后各時(shí)間點(diǎn)均低于A組和C組（P<0.05）。肺組織W/D比值及肺組織病理觀察到CPB開(kāi)始后肺組織的損傷逐漸加重，在CPB后2小時(shí)損傷最重。A組和C組肺泡腔內(nèi)可見(jiàn)較多血性滲出及明顯的炎性滲出液、炎性細(xì)胞廣泛聚集，間質(zhì)水腫。而經(jīng)過(guò)CoPP預(yù)處理組肺組織，其損傷程度明顯減輕。肺泡間質(zhì)