異紫堇堿對人宮頸癌SiHa細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤影響的研究.pdf

1、背景：宮頸癌是中國女性的第二大惡性腫瘤，發(fā)病率僅次于乳腺癌，嚴(yán)重危害女性健康。近年來，尋求能夠抑制腫瘤生長、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、阻滯腫瘤細(xì)胞周期和抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的中藥已經(jīng)成為防治宮頸癌的熱點。異紫堇堿（Isocorydine，ICD）是一種異喹啉類生物堿，是罌粟科植物紅茂草（Dicranostigma Leptodum or Maxim Fedde）的一種單體，具有廣泛的藥理活性，研究發(fā)現(xiàn)ICD可以誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞的凋亡和選擇性殺傷肝癌干細(xì)胞，

2、但關(guān)于ICD對宮頸癌的相關(guān)研究國內(nèi)外尚無文獻(xiàn)報道。
　　目的：本研究在前期體外實驗的基礎(chǔ)上，選取BALB/c裸鼠構(gòu)建人宮頸癌SiHa細(xì)胞皮下移植瘤模型，研究不同濃度的ICD對在體宮頸癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用。同時，比較不同濃度ICD組、陰性對照組和陽性對照組移植瘤組織中p53、HPV16E6、PARP、E-cad和Vimentin的表達(dá)，探討ICD發(fā)揮抑癌作用可能的機制，為ICD的進(jìn)一步開發(fā)提供動物實驗的依據(jù)。
　　方法：

3、將處于對數(shù)生長期的SiHa細(xì)胞皮下注射于裸鼠，構(gòu)造人宮頸皮下移植瘤模型，待移植瘤平均直徑≥0.5cm時，將裸鼠隨機分組，分別以不同濃度的ICD溶液、PBS溶液和紫杉醇溶液腹腔給藥。觀察ICD對人宮頸癌SiHa細(xì)胞皮下移植瘤模型的影響，計算腫瘤抑瘤率和生長抑制率；將處理過后的腫瘤組織HE染色，采用免疫組化和Western blot方法檢測不同處理組中p53、HPV16E6、PARP、E-cad和Vimentin的表達(dá)差異。結(jié)果：
　

4、　1、裸鼠成瘤率100％。
　　2、實驗過程中，各組裸鼠體重均有所增加，組間差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3、經(jīng)過ICD處理后的裸鼠移植瘤體積和移植瘤重量隨著ICD治療濃度的增加而逐漸減小，其中，ICD中劑量組與PBS陰性對照組、ICD高劑量組與PBS陰性對照組的組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　4、免疫組化和Western blot的結(jié)果表明，較PBS陰性對照組相比，ICD各處理組中p53和E-cad的表達(dá)逐

5、漸增強，HPV16E6、Vimentin和PARP的表達(dá)量減低。
　　結(jié)論：
　　1、ICD對裸鼠未產(chǎn)生明顯的體重抑制作用。
　　2、ICD對人宮頸癌SiHa細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤有抑制作用。
　　3、ICD可能通過抑制HPV16E6的表達(dá)，上調(diào)抑癌基因p53，影響腫瘤細(xì)胞的周期調(diào)控過程，進(jìn)而發(fā)揮抑癌作用。
　　4、ICD可能通過上調(diào)E-cad，下調(diào)Vimentin，逆轉(zhuǎn)EMT現(xiàn)象，進(jìn)而使腫瘤細(xì)胞向正常上皮細(xì)胞