噬血細(xì)胞綜合征炎癥因子表達(dá)水平變化及其意義研究.pdf

1、背景：噬血細(xì)胞綜合征(HPS)又被稱之為噬血細(xì)胞性淋巴組織細(xì)胞增生癥(HLH)，可分為原發(fā)或遺傳性與繼發(fā)性兩大類。原發(fā)或遺傳性患者大多具有噬血家族史，或者已經(jīng)被證明存在明確的基因突變，所以多數(shù)在嬰兒和兒童時(shí)期發(fā)?。焕^發(fā)性多由感染、腫瘤、自身免疫、藥源及移植等引起，故多見于成年人群。它的發(fā)病率雖然較低但是死亡率很高，大多數(shù)以持續(xù)發(fā)熱、肝脾腫大為主要的臨床癥狀，少數(shù)患者也有可能會(huì)遇到嚴(yán)重的癲癇發(fā)作和神經(jīng)系統(tǒng)損害等。因?yàn)樵缙诘陌Y狀不典型，給診

2、斷造成很大的困難，且病情進(jìn)展迅速，許多患者因?yàn)樵诎l(fā)病早期不能明確診斷，以致治療不及時(shí)而導(dǎo)致死亡。因此早期診斷對(duì)降低病人的死亡率極其重要，但因?yàn)槿狈π袠I(yè)公認(rèn)的診斷標(biāo)準(zhǔn)，由此就沒有黃金診斷標(biāo)準(zhǔn)的驗(yàn)證，所以早期診斷對(duì)臨床醫(yī)生仍然是一個(gè)嚴(yán)重的挑戰(zhàn)。隨著對(duì)HPS認(rèn)識(shí)的不斷加深，近年來雖然對(duì)該種病例報(bào)道逐步增多，但該病的發(fā)病機(jī)制尚不清楚。目前噬血細(xì)胞綜合征的具體的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，但多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，是免疫系統(tǒng)參與了HLH的發(fā)病過程，即：噬血細(xì)胞綜合征

3、存在促凋亡信號(hào)和固有免疫及適應(yīng)性免疫反應(yīng)相關(guān)基因表達(dá)下調(diào)，而協(xié)同編碼促炎因子和抗凋亡因子的基因表達(dá)上調(diào)的現(xiàn)象。這種觀點(diǎn)認(rèn)為，由于感染和腫瘤以及基因缺陷等病因的存在，導(dǎo)致了機(jī)體的免疫系統(tǒng)發(fā)生了紊亂，從而使 T細(xì)胞不斷增殖，Th1活化過度，導(dǎo)致Th1與Th2的比例失衡，大量的IFN-被產(chǎn)生，同時(shí)活化的CD8+細(xì)胞會(huì)生成大量細(xì)胞因子，因而會(huì)導(dǎo)致大量巨噬細(xì)胞被活化，而活化的巨噬細(xì)胞又會(huì)分泌出大量的炎性因子，例如：白介素12、白介素10、白介素1

4、8、腫瘤壞死因子α和其他白介素類，而其中白介素12可以使誘導(dǎo)分泌出Thl細(xì)胞因子的細(xì)胞發(fā)展，并且促進(jìn)NK細(xì)胞和這些細(xì)胞產(chǎn)生IFN-，因而可以形成惡性循環(huán)，這就是醫(yī)學(xué)界正所周知的“細(xì)胞因子風(fēng)暴”學(xué)說。這一系列不受抑制的效應(yīng)使得CTLs激活和Th細(xì)胞遷移，引起終末器官不可逆性損傷；又由于噬血細(xì)胞綜合征中淋巴結(jié)腫大、血細(xì)胞減少和凝血功能障礙等癥狀均由“細(xì)胞因子風(fēng)暴”所引起的以炎癥為主的全身綜合性反應(yīng)導(dǎo)致，故對(duì)患者炎癥因子的檢測(cè)有助于及時(shí)診斷噬

5、血細(xì)胞綜合征和判斷預(yù)后。本組研究通過檢測(cè)分析HPS患者各炎癥因子水平，我們擬尋找HPS患者與健康人群間各項(xiàng)指標(biāo)的差距，并對(duì)HPS患者組內(nèi)不同分期，不同轉(zhuǎn)歸人群進(jìn)行觀察，以幫助我們了解HPS的早期診斷和病程判斷。
　　目的：通過檢測(cè)噬血細(xì)胞綜合征與正常健康人群外周血清IL-8、IL-10、IL-6、TNF-α的水平變化，比較兩組間炎癥因子表達(dá)水平差異；探索并討論血清IL-8、IL-10、IL-6與TNF-α在臨床診斷中的作用，以及與

6、HLH臨床表現(xiàn)的相關(guān)性；以及在HLH治療前后的變化趨勢(shì)，并分析其在病情判斷、預(yù)后評(píng)估中的應(yīng)用價(jià)值。
　　方法：選取2013年10月~2015年5月在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院血液科確診和治療的28例噬血細(xì)胞綜合征患者，使用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法(ELISA)檢測(cè)這些受試者以及20名健康體檢者的血清TNF-α、IL-10、IL-6、IL-8的水平變化，比較兩組間炎癥因子表達(dá)水平差異；并將所有患者分為急性發(fā)作期組和緩解期組[48]，分別有16人

7、和12人，對(duì)比不同期患者上述幾項(xiàng)指標(biāo)血清水平；同時(shí)隨訪一年，觀察隨訪期內(nèi)噬血細(xì)胞綜合征患者死亡病例，對(duì)比死亡與存活患者間血清IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α水平差異。實(shí)驗(yàn)操作均嚴(yán)格依據(jù)設(shè)備和試劑盒說明書進(jìn)行操作；炎癥因子水平等計(jì)量資料均用(x±s)表示，同時(shí)檢驗(yàn)方法使用t檢驗(yàn)，當(dāng)P<0.05時(shí)作為存在著差異，才具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：⑴兩組患者炎癥因子表達(dá)水平比較：噬血細(xì)胞綜合征患者IL-6(36.7±8.4pg/m

8、l)、IL-8(56.9±10.1pg/ml)、IL-10(194.3±23.9pg/ml)、TNF-α(16.5±2.0pg/ml)水平顯著高于健康對(duì)照(4.5±0.8pg/ml、5.7±1.2pg/ml、3.0±0.5pg/ml、2.8±0.7pg/ml)(t=51.016，t=66.871，t=108.192，t=110.887，P<0.01)。⑵急性發(fā)作組和緩解組患者炎癥因子表達(dá)量比較：急性期患者IL-6(44.8±11.3pg

9、/ml)、IL-10(240.7±32.5pg/ml)水平顯著高于緩解期(24.8±7.5pg/ml、126.0±26.2pg/ml)(t=14.390，t=26.337，P<0.01)。⑶不同預(yù)后患者炎癥因子表達(dá)量差異：死亡組患者IL-6(121.0±15.6pg/ml)和TNF-α(22.7±6.3pg/ml)表達(dá)水平顯著高于存活組(16.1±4.6pg/ml、15.0±3.7pg/ml)(t=39.923，t=7.042，P<0.

10、01)。
　　結(jié)論：①噬血細(xì)胞綜合征患者血清白細(xì)胞介素6（IL-6）、白細(xì)胞介素8（IL-8）、白細(xì)胞介素10（IL-10）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）水平均顯著高于健康對(duì)照組，因此我們推測(cè)上述因子在噬血細(xì)胞綜合癥的炎癥反應(yīng)中均扮演著重要角色。即上述幾項(xiàng)指標(biāo)出現(xiàn)聯(lián)合顯著升高的現(xiàn)象對(duì)噬血細(xì)胞綜合征的早期診斷具有重要意義。②急性期患者的血清IL-6和IL-10水平明顯高于緩解期，但是IL-8與TNF-α水平差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，故對(duì)是