HOXA9與Ki-67在結腸癌組織中的表達及其臨床意義.pdf

1、背景:
　　結腸癌是消化道常見的惡性腫瘤之一，是全世界癌癥死亡的主要原因。近年來，隨著我國人民生活水平的提高和飲食結構的改變，結腸癌的發(fā)病率和病死率正在逐年上升。結腸癌已居我國惡性腫瘤死因的第5位，僅次于肺癌、胃癌、肝癌和食管癌。結腸癌的發(fā)生發(fā)展是一個多因素、多階段共同參與的復雜的生物學過程，目前由于對結腸癌分子生物學發(fā)病機制尚不完全明了，對它早期發(fā)現(xiàn)和預后判斷也不夠完善，因此積極探索結腸癌形成的分子機制，研究預測其生物學行為的標

2、志物對結腸癌的早期診斷、治療及預后判斷具有重要意義。
　　目的:
　　通過檢測正常結腸組織、結腸癌癌旁組織和結腸癌組織中同源異形盒基因HOXA9和細胞核相關抗原Ki-67的mRNA及蛋白表達情況，探討同源異形盒基因HOXA9和細胞核相關抗原Ki-67在結腸癌組織中的表達及臨床意義，為結腸癌的臨床治療和預后判斷尋找新的腫瘤標志物。
　　方法:
　　采用逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)方法檢測同源異形盒基因HOX

3、A9及細胞核相關抗原Ki-67在60例結腸癌組織、癌旁組織和正常結腸組織中的mRNA表達水平。采用蛋白印記法(Western blot)檢測HOXA9在結腸癌組織和正常結腸組織中的蛋白表達水平。采用免疫組化方法(Immunohistochemistry)進一步檢測HOXA9及Ki-67在60例結腸癌組織、癌旁組織和正常結腸組織中的蛋白表達，并明確其在結腸癌細胞中的表達定位，分析HOXA9與患者性別、發(fā)病年齡、腫瘤直徑大小、腫瘤分化程度、

4、TNM分期及有無淋巴結轉移之間的關系。以上方法檢測HOXA9及Ki-67在60例結腸癌組織、癌旁組織和正常結腸組織之間的表達差異，運用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計學分析。
　　結果:
　　1、同源異形盒基因HOXA9陽性為細胞質(zhì)或/及細胞膜中出現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒表達反應物，在結腸癌組織中HOXA9表達陽性率為74％(44/60)，而在正常結腸組織和結腸癌癌旁組織中表達陽性率為20%(12/60)和26.7%(16/60)，結

5、腸癌組織中HOXA9表達明顯高于正常結腸組織，有顯著性差異(P<0.05)。同源異形盒基因HOXA9mRNA的相對表達含量為(0.638±0.045)，明顯高于正常結腸組織(0.154±0.033)和癌旁組織(0.256±0.038)，HOXA9mRNA在結腸癌組織中的表達含量為正常結腸組織的4.14倍，差異有顯著性(P<0.05)。
　　2、Western blot證實，HOXA9蛋白表達水平在結腸癌組織中表達顯著高于配對正常組

6、織，與PCR及免疫組化結果一致。
　　3、細胞核相關抗原Ki-67陽性為細胞核中出現(xiàn)棕黃色顆粒表達反應物，在結腸癌組織中細胞核相關抗原Ki-67表達陽性率為80%(48/60)，而在正常結腸組織和結腸癌癌旁組織中表達陽性率為16.7%(10/60)和20%(12/60)，結腸癌組織中Ki-67表達亦明顯高于正常結腸組織，有顯著性差異(P<0.05)。細胞核相關抗原Ki-67mRNA在正常結腸組織、結腸癌癌旁組織和結腸癌組織中均有不

7、同程度的表達，相對表達量分別為0.164±0.025、0222±0.045、0.585±0.039，Ki-67mRNA在結腸癌組織中的表達含量為正常結腸組織的3.57倍，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　4、在結腸癌患者中，同源異形盒基因HOXA9表達與患者的發(fā)病年齡、性別、腫瘤直徑無明顯相關性(P均大于0.05)，而與腫瘤細胞分化程度、TNM分期及有無淋巴結轉移顯著相關(P<0.05)。TNM分期越晚、淋巴結轉移越早、腫瘤

8、分化程度越差，HOXA9表達量越高。
　　5、在結腸癌患者中，細胞核相關抗原Ki-67表達亦與結腸癌的腫瘤細胞分化程度、TNM分期及有無淋巴結轉移顯著相關(P<0.05)，與患者發(fā)病年齡、性別、腫瘤直徑大小亦無明顯相關性(P>0.05)。
　　6、在結腸癌組織中，同源異形盒基因HOXA9表達陽性組Ki-67陽性表達為90.9%，明顯高于同源異形盒基因HOXA9陰性組的表達50%，Pearson卡方值為12.27，P值小于0.

9、001，可認為二者表達有聯(lián)系；Kappa值為0.44，介于0.4至0.75之間，顯示同源異形盒基因HOXA9與細胞核相關抗原Ki-67的表達在結腸癌中表達具有一致性，一致性程度為中度一致，表達結果一致性較為滿意。
　　結論:
　　1、HOXA9在正常結腸組織、結腸癌癌旁組織及結腸癌組織中的表達呈逐漸增高的趨勢，提示同源異形盒基因HOXA9與結腸癌的發(fā)生有著密切關系，HOXA9基因的表達上調(diào)能夠促進正常結腸細胞向腫瘤細胞分化，

10、在結腸癌發(fā)生發(fā)展的過程中可能扮演著重要角色。
　　2、HOXA9的表達強度與結腸癌的腫瘤分化程度、TNM分期及有無淋巴結轉移顯著相關，TNM分期越晚、淋巴結轉移越早、腫瘤分化程度越差，HOXA9表達量就越高，提示同源盒基因HOXA9在促進結腸癌細胞增值、浸潤及轉移過程中起著重要作用。HOXA9高表達可能成為判斷結腸癌惡性程度高，患者預后差的信號之一。
　　3、HOXA9與Ki-67在結腸癌中的表達具有一致性，提示HOXA9可