Sox3在不同發(fā)育階段SD大鼠穹窿下器細(xì)胞的表達(dá).pdf

1、目的:觀察出生后不同發(fā)育階段大鼠穹窿下器(subfornicalorgan，SFO)的Sox2陽(yáng)性細(xì)胞的形態(tài)及分布特征，觀察其表達(dá)情況。
　　方法:雄性健康SD大鼠，分為幼年組和成年組，每組各24只，清潔級(jí)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不作任何處理。
　　1、標(biāo)本制備
　　常規(guī)動(dòng)物標(biāo)本制備:將兩組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用水合氯醛(0.3ml/100g)麻醉后，自主動(dòng)脈灌注4％多聚甲醛磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L，PH7.2)進(jìn)行前固定，立即取腦，進(jìn)行

2、后固定。將組織標(biāo)本經(jīng)脫水，透明，包埋，選取含穹窿下器部分，石蠟切片機(jī)冠狀面切片，厚度約為5μm，制成石蠟切片。對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處置符合動(dòng)物倫理學(xué)要求。
　　2、染色
　　常規(guī)免疫組織化學(xué)染色:將上述石蠟切片經(jīng)Sox2染色，使用中性樹膠封片后，顯微鏡觀察、照相。
　　3、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
　　選取相同SFO的橫斷面，使用多媒體真彩病理圖文分析系統(tǒng)，在20倍鏡下，通過(guò)計(jì)數(shù)SFO內(nèi)細(xì)胞總數(shù)和Sox2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，計(jì)算出陽(yáng)性細(xì)胞率，

3、計(jì)量資料均采用(x)±s表示。
　　結(jié)果:
　　1、不同發(fā)育階段大鼠Sox2陽(yáng)性細(xì)胞在SFO的分布。
　　幼年組大鼠的SFO，腹側(cè)部的室管膜Sox2陽(yáng)性細(xì)胞排列整齊而密集，中央部的室管膜陽(yáng)性細(xì)胞多為雙層，也有呈現(xiàn)單層，外側(cè)部的多為三層，甚至多層排列。背側(cè)部有稀疏的Sox2弱陽(yáng)性細(xì)胞散在分布。外側(cè)部大血管周圍有密集的強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞，且陽(yáng)性細(xì)胞多位于血管的腹側(cè)，甚至延伸至兩血管之間，大血管的背側(cè)多為陰性細(xì)胞散在分布。中央部有密

4、集的Sox2免疫陽(yáng)性細(xì)胞。中央部可見(jiàn)細(xì)小的血管，周圍多為Sox2陰性細(xì)胞。
　　成年組大鼠的SFO，腹側(cè)部的Sox2陽(yáng)性細(xì)胞較密集，室管膜及室管膜下有密集的強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞，靠近中央部室管膜的陽(yáng)性細(xì)胞排列為雙層或單層，外側(cè)部的為三層，甚至多層排列。背側(cè)部Sox2陽(yáng)性細(xì)胞較稀疏，散在分布。外側(cè)部大血管周圍未見(jiàn)密集的強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞。在中央部可見(jiàn)強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞和弱陽(yáng)性細(xì)胞散在分布，偶見(jiàn)胞核巨大的陽(yáng)性細(xì)胞。中央部可見(jiàn)細(xì)小的血管，周圍多為Sox2陰性細(xì)胞

5、。
　　2、不同發(fā)育階段大鼠SFO中Sox2陽(yáng)性細(xì)胞的形態(tài)特征。
　　在幼年組大鼠的SFO，可見(jiàn)強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞，細(xì)胞核為深褐色，室管膜及室管膜下的陽(yáng)性細(xì)胞，細(xì)胞核較小，多為圓形或卵圓形，大小為3.7μm～5.3μm*2.6μm～5.4μm，大血管之間的強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞核為長(zhǎng)橢圓形或長(zhǎng)條形，大小為3.3μm～9.4μm*2.5μm～3.3μ m;中央部弱陽(yáng)性細(xì)胞細(xì)胞核為淺褐色，圓形或卵圓形，大小為6.1μm～7.5μm*3.8μm～7.

6、1μm，偶見(jiàn)細(xì)胞核大小為11.1μm～12.7μm*8.3μm～9.2μm的弱陽(yáng)性細(xì)胞。
　　在成年組大鼠的SFO，可見(jiàn)強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞，細(xì)胞核為深褐色，室管膜及室管膜下的陽(yáng)性細(xì)胞核較小，多為圓形或卵圓形，大小為3.3μm～5.5μm*2.8μm～5.8μm，中央部的強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞核為橢圓形或長(zhǎng)條形，大小為1.3μm～2.0μm*3.4μm～5.0μm;中央部的弱陽(yáng)性細(xì)胞細(xì)胞核為淺褐色，多為圓形或卵圓形，大小為3.7μm～5.3μm*3.9

7、μm～6.9μm，偶見(jiàn)細(xì)胞核大小為8.3μm～9.6μm*13.9μm～14.2μm的弱陽(yáng)性細(xì)胞。
　　3、不同發(fā)育階段Sox2陽(yáng)性細(xì)胞分布的比較。
　　幼年組SD大鼠穹窿下器Sox2陽(yáng)性細(xì)胞率為65.58％±4.23％，成年組為52.13％±6.56％。兩組的數(shù)據(jù)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　4、在成年組SD大鼠SFO的背外側(cè)附近發(fā)現(xiàn)Sox2陽(yáng)性細(xì)胞的分裂相。其左下方處，即室管膜下區(qū)，可見(jiàn)一同一類型的神經(jīng)細(xì)

8、胞相互連接成鏈。
　　5、在幼年組SD大鼠SFO的腹側(cè)室管膜處可見(jiàn)Sox2強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞簇，由4個(gè)強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞組成。其背側(cè)為三個(gè)形態(tài)一致，大小為4.0μm～5.6μm*3.0μm～1.7μm的細(xì)胞核，腹側(cè)核為長(zhǎng)條形，大小為5.5μm*1.7μm。
　　結(jié)論:
　　1、Sox2陽(yáng)性細(xì)胞，在幼年SD大鼠的SFO中表達(dá)數(shù)量多于成年SD大鼠的SFO中表達(dá)數(shù)量。
　　2、幼年和成年SD大鼠SFO中Sox2陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞背側(cè)部稀疏，