2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、水稻是世界上最重要的糧食作物之一,也是植物分子生物學研究的良好單子葉植物模式生物。近年來,轉基因水稻被廣泛的研究應用。然而,由于轉基因的遺傳及表達的不穩(wěn)定性和不可預知性,轉基因引起的水稻雌雄配子體發(fā)育問題使許多轉基因水稻株系在育種上無法利用。因此,開展水稻花粉發(fā)育突變體篩選、相關功能基因克隆及研究不僅對水稻花粉發(fā)育及相關的基礎生物學研究具有重要的理論意義,而且對雜交稻及水稻轉基因育種具有重要的實際意義。 本文通過對多216個候選

2、株系進行外源標記基因的遺傳分析,結合花粉細胞學觀察和外源基因表達定量分析,建立了具有38個株系的水稻T-DNA插入雄配子不育突變體群體:借助TAIL-PCR技術,已獲得22個雄配子體突變體中轉基因插入位點側翼序列的分子特征信息。選取了2個候選基因進行了基因克隆和相關表達載體的構建,獲得了相應表達載體的轉基因植株。獲得的主要研究結論有: 1、對篩選到216個自交后代外源標記基因能夠穩(wěn)定保持1:1分離的轉基因水稻株系采用測交和/或雜

3、交方法檢測外源標記基因(hpt基因)的遺傳規(guī)律,初步確定其中57個株系為雄配子不育候選突變體,39個株系為雌配子不育候選突變體。對上述雄配子不育候選突變體,通過多代測交和/或雜交方法進行外源標記基因的遺傳分析,結合花粉細胞學觀察和外源基因表達定量分析,建立了一個包含38個突變體的水稻T-DNA插入雄配子不育突變體群體。 2、利用TAIL-PCR獲得了22個水稻雄配子不育T-DNA插入突變體的側翼序列,依據BLAST結果及注釋信息

4、,發(fā)現(xiàn)有15個不同的插入位點,存在多個突變體插入相同位點或區(qū)域的現(xiàn)象,暗示了可能存在插入熱點。12個插入位點位于基因區(qū)或基因調控區(qū),獲得了數(shù)個候選基因。 3、利用我們先前獲得到序列信息,選擇了其中2個候選基因(1個WRKY鋅指轉錄因子和1個未知保守蛋白)的啟動子序列和其中未知保守蛋白基因序列,以pCAMBIA1300為骨架分別構建了這兩個候選基因上游啟動子區(qū)與GUS基因融合的表達載體p1300JM1P和p1300JM6P?;谖?/p>

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