宿主抵御病原菌入侵的新機(jī)制：病原菌效應(yīng)蛋白的谷胱甘肽化修飾.pdf

1、蛋白質(zhì)的谷胱甘肽化修飾(S-glutathionylation)屬于蛋白質(zhì)翻譯后修飾的一種，是指在蛋白質(zhì)的半胱氨酸殘基上引入一個(gè)谷胱甘肽(GSH，γ-Glu-Cys-Gly)的小分子基團(tuán)，存在于許多細(xì)胞內(nèi)，具有抗氧化、解毒、調(diào)節(jié)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞增殖等重要作用。最近研究表明，其在防御病原菌入侵宿主方面也發(fā)揮著一個(gè)重要的功能，而這種作用機(jī)制目前仍是未知的?；诖藢?duì)其展開了研究，并猜測(cè)可能存在的兩種機(jī)制:一種是病原菌自身蛋白質(zhì)發(fā)生谷胱甘肽化

2、修飾，從而減弱了它入侵宿主的能力;另一種可能是宿主自身的蛋白質(zhì)發(fā)生了谷胱甘肽化修飾，從而積極地抵御病原菌的入侵。
　　在前期開展的研究中發(fā)現(xiàn),志賀氏菌的效應(yīng)蛋白在體外能發(fā)生谷胱甘肽化修飾，因此將研究重點(diǎn)放在病原體自身蛋白質(zhì)發(fā)生谷胱甘肽化修飾。具體開展了以下研究:
　　利用谷胱甘肽化修飾的體外重組體系及質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證OspF是否能在體外發(fā)生這種修飾;隨后進(jìn)一步探討谷胱甘肽化修飾后的OspF，對(duì)其酶活以及與底物結(jié)合力的影響;隨后深

3、入到病原病感染哺乳動(dòng)物細(xì)胞，研究OspF發(fā)生谷胱甘肽化修飾的情況。最后還對(duì)其它的病原菌效應(yīng)蛋白SpvC、OspB、OspC、IpaH、YopJ等的谷胱甘肽化修飾也進(jìn)行了初步探討。
　　研究結(jié)果表明:1）OspF蛋白都能夠在體外發(fā)生谷胱甘肽化修飾反應(yīng)，且這種修飾受氧化還原壓力調(diào)節(jié);2）發(fā)生谷胱甘肽化修飾的OspF蛋白自身的酶活和與底物結(jié)合的能力均下降;3）志賀氏菌感染真核細(xì)胞后體內(nèi)表達(dá)的OspF確實(shí)能發(fā)生谷胱甘肽化修飾，使MAPK信