尼克酰胺甲基轉移酶影響胃癌細胞的生物學功能和患者預后.pdf

1、目的:
　　在臨床實踐中，一些指標被廣泛用于預測胃癌患者的預后。這些指標包括如癌胚抗原(CEA)、ca199等分子標志物的聯合檢測以及腫瘤分期與分級的劃分。但是，這些預測患者預后的方法依然有一定的局限性，所以，胃癌仍然是最致命的人類惡性腫瘤之一。代謝酶尼克酰胺甲基轉移酶(NNMT，EC.2.1.1.1)曾被報道參與各種癌的進展和發(fā)展。然而，NNMT在胃癌中的預后和生物功能尚不清楚。
　　方法:
　　1.利用定量逆轉錄-

2、聚合酶鏈反應(qRT-PCR)檢測胃癌患者新鮮組織（包括腫瘤組織和瘤旁組織）NNMT的mRNA表達是否存在差異。
　　2.采用免疫組織化學(IHC)的方法，檢測蠟塊中良惡性胃粘膜上皮組織中的NNMT蛋白質表達的差異。
　　3.統(tǒng)計并評估患者胃癌組織中NNMT蛋白表達與臨床病理及預后的關系。
　　4.利用siRNA介導，抑制NNMT在胃腺癌細胞株MGC803、BGC823中的表達，探究NNMT在胃癌細胞系體內外的生物學功

3、能。
　　5.充分檢索并分析數據庫TCGA，并利用cBioPortal網站計算并得出NNMT共表達基因列表，采用DAVID Bioinformatics Resources6.7對列表中的高表達相關性基因進行富集分析。
　　結果:
　　1.通過qRT-PCR實驗發(fā)現與鄰近非癌組織相比，NNMT的mRNA和蛋白水平在胃癌組織中上調;通過免疫組化實驗發(fā)現NNMT蛋白表達水平在胃癌組織中的表達明顯升高(56.8％vs31.9

4、％)。
　　2.NNMT的蛋白表達水平與原發(fā)腫瘤大小、淋巴結轉移、遠處轉移和TNM分期有相關性。
　　3.單因素和多因素COX回歸生存分析驗證了NNMT的蛋白表達是胃癌患者總存活率的獨立預后因素。
　　4.用siRNA干擾胃癌細胞系MGC803、BGC823中NNMT的表達水平，細胞增殖、侵襲和遷移在體內外都受到了抑制。
　　結論:
　　總體而言，這項研究的結果表明NNMT的表達在胃癌組織中上調，并能促進胃