miR-199靶向調(diào)控ROCK1影響腎癌細胞增殖、侵襲及凋亡的機制研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2010級博士學(xué)位論文miR一199靶向調(diào)控ROCKl影響腎癌細胞增殖、侵襲及凋亡的機制研究StudyonmiR一199affectskidneycellproliferation，invasionandapoptosisbytargetingROCK1課題來源：無學(xué)位申請人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院答辯委員會主席答辯委員會委員陳鵬亮鄭少斌泌尿外科學(xué)術(shù)型博士研究生第一臨床醫(yī)學(xué)院丘少鵬教授胡衛(wèi)列教授周祥福教授鐘惟

2、德教授毛向明教授2015年3月20日廣州中文摘要胞系中過表達miR200c、miR141可下調(diào)ZEB2蛋白表達，從而抑制腫瘤細胞的黏附和侵襲；低表達于腎癌組織的miR34a，通過調(diào)控YYl抑制腎癌細胞的增殖和侵襲：miR27a可下調(diào)FOX01表達，進而促進腎癌細胞的增殖；miR134通過靶向調(diào)節(jié)KRAS，起到抑帶1J7860腎透明細胞癌細胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用。同時，近年來研究也發(fā)現(xiàn)miR199a低表達于。腎癌組織，可能作為一個抑癌基因

3、，參與腎癌的發(fā)生，但其作用機制及其生物學(xué)功能研究尚少，很多機制尚未完全闡明，仍具有較大的潛在研究價值。為此，我們開展了本研究。目的1探討miR199a在腎癌及癌旁相對正常組織中的表達，分析其表達與腎癌患者預(yù)后的關(guān)系；2探討miR199a在腎癌中的表達對細胞增殖、侵襲及凋亡的影響；3探討miR199a與其下游靶基因及上游調(diào)控基因的作用關(guān)系，闡明miR199在腎癌中的作用機制；方法1采用qRTPCR定量檢測miR199a在39例腎癌患者腫瘤

4、組織及其癌旁相對正常腎組織中的表達量，并分析miR199a在。腎癌中的表達與患者預(yù)后的關(guān)系。2采用慢病毒感染的方法，構(gòu)建穩(wěn)定過表達miR199a的A498細胞株和空載對照組細胞株，并采用qRTPCR進行驗證。3采用MTT實驗、平板克隆實驗檢測腎癌細胞的增殖情況；應(yīng)用Transwell試驗檢測細胞的侵襲能力；利用流式細胞儀檢測。腎癌細胞的凋亡情況。4通過靶基因預(yù)測網(wǎng)站，結(jié)合生物信息學(xué)分析篩選miR199a下游的候選靶基因，明確ROCKl可