喜樹營養(yǎng)器官的結構及喜樹堿含量動態(tài)變化的研究.pdf

1、喜樹(CamptothecaacuminataDecne.)，隸屬于藍果樹科(Nyssaceae)，為多年生落葉喬木，我國特有樹種，主要分布在長江流域及西南各省。全株因富含具獨特抗癌機理的喜樹堿而深得植物學界和醫(yī)藥學界的親睞。本文利用植物解剖學的方法研究了喜樹營養(yǎng)器官的結構；通過組織培養(yǎng)的方法分別對喜樹營養(yǎng)器官進行愈傷組織的誘導和繼代，并篩選出不同的細胞系，運用HPLC法測定各愈傷組織中喜樹堿的含量，并在培養(yǎng)基中外加誘導子，分析其對愈傷

2、組織中喜樹堿含量的影響；通過對喜樹不同器官、不同地理種源、不同季節(jié)變化、不同發(fā)育階段等喜樹堿含量的動態(tài)變化分析，總結出喜樹堿積累的一些基本規(guī)律；運用UV-B輻射分別對1年生和2年生喜樹進行處理，通過對各項生理指標及喜樹堿含量的測定，發(fā)現UV-B輻射能明顯提高喜樹中喜樹堿的含量。通過以上方法的系統(tǒng)研究，取得的主要結果如下： 1.喜樹根尖縱切面的結構與一般雙子葉植物結構相同，由根冠、分生區(qū)、伸長區(qū)和根毛區(qū)四個部分組成。根和莖的初生結

3、構都由表皮、皮層和維管柱3部分組成。在根和莖初生結構的皮層和髓部具有被鋨酸染成黑色的嗜鋨細胞。在次生生長中，根的木栓形成層起源于中柱鞘，莖的木栓形成層起源于皮層細胞；隨著次生維管組織的增加，莖的中央形成髓腔。通過掃描電子顯微鏡和光學顯微鏡觀察，喜樹葉的上表皮沒有氣孔器分布；下表皮氣孔器的保衛(wèi)細胞呈腎形，沒有副衛(wèi)細胞，被幾個表皮細胞不規(guī)則的圍繞，屬于無規(guī)則型。在上下表皮均分布著單細胞非腺毛和兩種類型的腺毛，其中下表皮的分布相對稠密；上表皮

4、腺毛呈球形，下表皮腺毛大部分為長卵形，其中間雜著一些球形腺毛。通過觀察發(fā)現，越幼嫩的葉中，分布的腺毛和非腺毛越多。葉片由表皮、葉肉和葉脈組成，葉肉細胞中分布有嗜鋨細胞。 2.不同外植體誘導的愈傷組織經繼代培養(yǎng)后，篩選紅色、黃色和褐色三個不同的細胞系，分別測定其喜樹堿的含量。結果表明，經幼葉所誘導的愈傷組織中喜樹堿含量相對高于其它，芽和莖誘導的愈傷組織中喜樹堿含量相差不大；紅色和黃色的細胞系在不同的外植體中其喜樹堿含量均高于褐色的

5、細胞系。但從整體看來，愈傷組織中喜樹堿的含量遠遠低于原植物中的含量，僅占原植物含量的百分之幾。外加誘導子對愈傷組織中喜樹堿的含量有影響，濃度為0.1mg/L，1mg/L的水楊酸和茉莉酸甲酯處理的愈傷組織中喜樹堿含量提高，0.1mg/L的水楊酸對喜樹堿的積累有明顯的促進作用，茉莉酸甲酯的影響不大；濃度為3mg/L，5mg/L的水楊酸處理的愈傷組織中，喜樹堿含量降低；3mg/L的茉莉酸甲酯處理的愈傷組織中，喜樹堿含量降低，5mg/L處理的愈

6、傷組織中未檢測到喜樹堿。 3.不同器官中，喜樹堿含量以幼葉、種子和幼枝中較高，木質部中較低，髓中含量最少，同一植株中，項枝喜樹堿的含量高于側枝。不同地理種源的1年生和2年生喜樹幼枝中喜樹堿均以四川成都含量最高，2年生喜樹幼枝中喜樹堿含量均高于1年生的。在一個生長季中，2年生和3年生喜樹幼枝和幼葉中喜樹堿含量呈現季節(jié)性變化，從4月份新枝萌動到7月份生長旺盛期，喜樹堿含量逐漸增高，7月份喜樹堿含量達到最高，以后逐漸降低。另外2年生植

7、株枝葉的含量均高于3年生。從時間、空間研究葉的發(fā)育表明，隨著葉的發(fā)育成熟，葉中喜樹堿的含量逐漸降低。同一葉的不同部位，喜樹堿含量也有差異。 4.UV-B輻射對喜樹葉內葉綠素、MDA、Fpro和SOD活性均產生一定的影響。隨著UV-B輻射時間的增加，葉綠素含量不斷降低；Fpro的含量不斷增加；MDA含量的變化不太顯著，但總體呈上升趨勢；SOD活性先下降，后上升，再下降；各器官中喜樹堿含量比對照都有增加，其中幼葉和幼莖中喜樹堿含量增