黃刺玫果實(shí)黃酮類成分及其抗凝血活性研究.pdf

1、黃刺玫(Rosa xanthina Lindl.)，又稱黃刺莓、刺玫花，為薔薇科薔薇屬植物，廣泛分布我國山西、陜西、河北、遼寧、吉林等省份。黃刺玫果實(shí)味酸甘性平，有健脾養(yǎng)血、理氣調(diào)經(jīng)的功用。其花、果、葉和根皮等均可入藥，可治療頑固淋病、細(xì)菌性痢疾或婦女月經(jīng)不調(diào)等疾病。目前，國內(nèi)外文獻(xiàn)調(diào)研發(fā)現(xiàn)黃刺玫同屬植物山刺玫已有廣泛深入的研究和應(yīng)用，而黃刺玫在化學(xué)成分、生物活性及資源開發(fā)等方面的研究較少。
　　本文以黃刺玫果實(shí)作為研究對象，對其

2、進(jìn)行了化學(xué)成分研究，并通過對凝血酶原時(shí)間(PT)、活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶時(shí)間(TT)、凝血酶水解纖維蛋白原時(shí)間和凝血酶抑制活性實(shí)驗(yàn)，以及纖維蛋白的溶解作用的研究，初步探討了黃刺玫果實(shí)中抗凝血成分的作用機(jī)制。主要研究內(nèi)容如下：
　　第一部分：首先，用75％乙醇對黃刺玫果實(shí)進(jìn)行提取，然后采用液-液萃取和硅膠、Sephadex LH-20、MDS柱色譜以及半制備高效液相色譜等方法進(jìn)行了分離純化，最后通過理化分析和波譜分

3、析從黃刺玫果實(shí)中分離鑒定了6個(gè)單體化合物，分別為槲皮素-3-O-α-L-鼠李吡喃糖苷(1)、槲皮素-3-O-(6''-O-反式香豆?；?-β-D-葡萄糖苷(2)、山奈酚-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、槲皮素-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、1,2-二(4-羥基-3-甲氧基苯基)-1,3-丙二醇(5)、2,3-二羥基-1-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-1-丙酮(6)。其中化合物6是首次從本屬植物中分離得到，化合物1~5為從黃

4、刺玫中首次分離得到。
　　第二部分：對分離得到的槲皮素-3-O-α-L-鼠李吡喃糖苷(Quercitrin)和槲皮素-3-O-(6''-O-反式香豆?；?-β-D-葡萄糖苷(Helichrysoside)進(jìn)行了抗凝血活性研究。首先，對凝血指標(biāo)(PT、APTT、TT)進(jìn)行了評價(jià)。研究結(jié)果顯示：在0.89 mM到10.71 mM濃度范圍內(nèi)，Quercitrin能夠顯著延長PT(從13.3 s延長至24.1 s, P<0.01)；在1.

5、31 mM到2.62 mM濃度范圍內(nèi)，Helichrysoside能夠顯著延長PT(從14.3 s延長至20.7 s, P<0.01)；在2.68 mM到7.14 mM濃度范圍內(nèi)，Quercitrin能夠顯著延長APTT(從41.5 s延長至60.7 s, P<0.01)；在0.66 mM到3.93 mM濃度范圍內(nèi)，Helichrysoside能夠顯著延長APTT(從41.2 s延長至142.9 s, P<0.01)；在0.89 mM到

6、7.14 mM濃度范圍內(nèi)，Quercitrin能夠顯著縮短TT(從18.3 s縮短至14.3 s, P<0.01)；在0.66 mM到3.93 mM濃度范圍內(nèi)，Helichrysoside能夠顯著縮短TT(從18.0 s縮短至9.4 s, P<0.01)，并呈劑量依賴性。其次，凝血酶水解纖維蛋白原時(shí)間研究表明：在0.89 mM到3.57 mM濃度范圍內(nèi)，Quercitrin能夠顯著延長凝血酶水解纖維蛋白原時(shí)間(從36.2s延長至41.2

7、s,P<0.01)，在0.08 mM到5.36 mM濃度范圍內(nèi)，Quercitrin對凝血酶的抑制作用呈現(xiàn)出劑量依賴性，并且，當(dāng)Quercitrin濃度為1.34mM時(shí)，抑制率能達(dá)到98.6%。最后，運(yùn)用纖維蛋白平板法測定了纖溶活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：與尿激酶相比，不同濃度 Quercitrin(3.57、7.14、14.29 mM)和Helichrysoside(2.62、5.25、10.49 mM)對纖維蛋白沒有溶解作用。上述抗凝血活性