ALK重排非小細(xì)胞肺癌患者ALK變體亞型、ALK陽性細(xì)胞百分比、克唑替尼治療時機(jī)對克唑替尼療效的預(yù)測作用.pdf

1、肺癌因其發(fā)病率和死亡率增長最快，已成為人群健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一。
　　表皮生長因子受體(EGFR)突變多見于非吸煙女性腺癌患者，該基因的突變狀態(tài)可以有效的預(yù)測酪氨酸激酶抑制劑(TKIs)如吉非替尼(gefitinib)，厄洛替尼(erlotinib)的療效，存在EGFR敏感突變(19外顯子缺失/21外顯子L858R點(diǎn)突變)的患者在經(jīng)過靶向藥物酪氨酸酶抑制劑(EGFR-TKIs)治療后能有效的緩解腫瘤的發(fā)生發(fā)展，延長患者

2、的總生存期(OS)。
　　間變性淋巴瘤激酶(ALK)同樣是目前非小細(xì)胞肺癌中研究較多的驅(qū)動基因。
　　本研究旨在通過對比FISH法和RACE-PCR法檢測ALK基因重排的一致性，并以FISH法作為檢測標(biāo)準(zhǔn)，評估RACE-PCR法檢測ALK融合基因的敏感度和特異性，為臨床選擇何種檢測手段進(jìn)行ALK融合基因檢測提供參考。同時探討ALK融合基因的變體亞型、FISH法ALK陽性細(xì)胞百分比、克唑替尼治療時機(jī)對克唑替尼療效的預(yù)測作用。<

3、br>　　第一部分FISH法和RACE-PCR法檢測ALK融合基因的方法學(xué)對比
　　目的:探討FISH法和RACE-PCR法檢測ALK融合基因的一致性。
　　方法:篩選出2011年1月至2015年3月在廣東省肺癌研究所采用FISH或cDNA末端快速克隆(RACE)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)進(jìn)行ALK融合基因檢測的所有患者信息。所有患者的基因檢測均取得患者的知情同意。入組標(biāo)準(zhǔn):1）組織學(xué)或細(xì)胞學(xué)證實(shí)為肺癌;2）同時進(jìn)行FISH

4、法和RACE-PCR法檢測ALK融合基因。應(yīng)用SPSS22.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，兩種檢測方法的吻合度檢測采用卡方檢驗(Kappa)。所有的P值都為雙側(cè)檢驗，以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:共88例肺癌患者同時采用這兩種方法進(jìn)行ALK融合基因檢測。FISH法和RACE-PCR法均證實(shí)ALK基因融合的有60例(68.2％)，兩種方法均陰性的有20例(22.7％)，兩種方法的在進(jìn)行ALK融合基因檢測上

5、吻合度好(Kappa=0.771，P＜0.001)。
　　結(jié)論:FISH法和RACE-PCR法檢測ALK融合基因的吻合度高。以FISH法作為檢測標(biāo)準(zhǔn)，RACE-PCR法敏感度高，特異性強(qiáng)。
　　第二部分ALK融合基因變體亞型對克唑替尼療效的預(yù)測作用
　　目的:探討ALK融合基因變體亞型對克唑替尼療效的預(yù)測作用。
　　方法:篩選出2010年12月至2015年3月在廣東省肺癌研究所診治并接受ALK基因檢測的全部肺癌病

6、例，所有患者的基因檢測均獲得患者的知情同意。入選患者標(biāo)準(zhǔn)包括:1）組織或細(xì)胞學(xué)證實(shí)為非小細(xì)胞肺癌;2）FISH、RACE-PCR或IHC檢測為ALK重排;3）至少有一個可評價的靶病灶;4）有詳細(xì)的臨床治療信息;5）接受過克唑替尼治療。患者的臨床特征及治療病史均來自廣東省人民醫(yī)院電子病歷系統(tǒng)。
　　腫瘤評價采用實(shí)體瘤評價標(biāo)準(zhǔn)(RECIST1.1)，無進(jìn)展生存期(PFS)定義為從接受克唑替尼治療開始至疾病進(jìn)展或任何原因?qū)е碌乃劳??？偵?/p>

7、存期定義為患者診斷為Ⅳ期的時間至患者死亡的時間。刪失數(shù)據(jù)定義為截止最后隨訪時間存活或者失訪。
　　采用SPSS22.0統(tǒng)計軟件對結(jié)果進(jìn)行分析;各組病例臨床參數(shù)和克唑替尼有效率的檢驗采用卡方檢驗分析，理論頻數(shù)小于5者采用Fisher確切概率法分析，單變量生存分析用Kaplan-Meier法，各亞組間差異比較用Log-rank分析。所有的P值均為雙側(cè)檢驗，以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:1.ALK

8、變體亞型頻率及其臨床特征.120例符合條件的ALK重排Ⅲ或Ⅳ期非小細(xì)胞肺癌患者接受了克唑替尼治療。進(jìn)行三組患者的年齡、性別、吸煙史、ECOG PS評分、病理類型、EGFR突變狀態(tài)等臨床因素比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。2.ALK變體亞型與克唑替尼有效率的關(guān)系.采用卡方檢驗比較三組患者對克唑替尼的客觀緩解率和疾病控制率，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.214; P=0.512)。3.ALK變體亞型與克唑替尼無進(jìn)展生存期的關(guān)系.
　　結(jié)論:1.E

9、ML4-ALK V1和EML4-ALK V3a/b是最常見的兩類ALK變體亞型。2.ALK變體亞型與克唑替尼有效率和無進(jìn)展生存期無相關(guān)性。3.克唑替尼對各種ALK變體亞型的患者均有效。
　　第三部分FISH法ALK陽性細(xì)胞百分比對克唑替尼療效的預(yù)測作用
　　目的:探討FISH法檢測的ALK陽性細(xì)胞百分比對克唑替尼療效的預(yù)測作用。
　　方法:從第二部分研究群體篩選出114例使用FISH法確認(rèn)ALK重排的患者，106例有明

10、確FISH法ALK陽性細(xì)胞百分比。以FDA建議的FISH法ALK絕對陽性細(xì)胞百分比50％作為分組變量。
　　結(jié)果:1.FISH法ALK陽性細(xì)胞百分比分布.106例患者FISH法ALK陽性細(xì)胞百分比的平均數(shù)為60.8％(Range:16％-98％)。2.FISH法ALK陽性細(xì)胞百分比與克唑替尼有效率的關(guān)系.106例患者的總體客觀緩解率為69.8％，疾病控制率為90.6％。以FISH法ALK陽性細(xì)胞百分比50％作為分組變量，比較兩組患

11、者對克唑替尼的客觀緩解率和疾病控制率，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.658; P=0.142)。采用Kendall's tau_b相關(guān)分析探索ALK陽性細(xì)胞百分比與克唑替尼最佳療效的相關(guān)性，結(jié)果顯示ALK陽性細(xì)胞百分比與克唑替尼最佳療效成較弱的相關(guān)性(rk=0.231，P=0.003)。3.FISH法ALK陽性細(xì)胞百分比與克唑替尼無進(jìn)展生存期的關(guān)系
　　結(jié)論:1.FISH法ALK陽性細(xì)胞百分比的波動范圍較大。2.FISH法ALK陽性細(xì)

12、胞百分比與克唑替尼最佳療效有較弱的相關(guān)性。3.FISH法ALK陽性細(xì)胞百分比與克唑替尼無進(jìn)展生存期有較弱的相關(guān)性。
　　第四部分克唑替尼治療時機(jī)對克唑替尼療效的預(yù)測作用
　　目的:探討克唑替尼治療時機(jī)對克唑替尼療效的預(yù)測作用。
　　方法:納入分析第二部分符合入組標(biāo)準(zhǔn)的患者。采用SPSS22.0統(tǒng)計軟件對結(jié)果進(jìn)行分析;各組病例臨床參數(shù)和克唑替尼有效率的分析采用卡方檢驗，理論頻數(shù)小于5者采用Fisher確切概率法分析，單變

13、量生存分析用Kaplan-Meier法，各亞組間差異比較用Log-rank分析，多變量生存分析使用Cox回歸，克唑替尼有效率的多因素分析使用Logistic分析。所有的P值都為雙側(cè)檢驗，以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:1.入組患者臨床特征.120例符合條件的ALK重排Ⅲ或Ⅳ期非小細(xì)胞肺癌患者接受了克唑替尼治療，患者的中位年齡為48歲，多數(shù)患者年齡＜65歲(90.8％)，非吸煙者(78.3％)，接受克

14、唑替尼治療時ECOG PS評分≤1分(91.7％)，腺癌(96.7％)，其中6例(5.0％)患者合并有EGFR雙突變。一線接受克唑替尼治療的患者45例(37.5％，45/120)。其中68例(56.7％)入組PROFILE系列臨床試驗并接受克唑替尼治療。2.克唑替尼治療線數(shù)與克唑替尼有效率的關(guān)系.120例患者中，總體客觀緩解率為69.2％，疾病控制率為90.0％。一線使用克唑替尼的ORR為77.8％，DCR為95.6％;二線使用克唑替尼

15、的ORR為65.3％，DCR為91.8％。比較一線和二線使用克唑替尼的ORR和DCR，結(jié)果顯示差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.182; P=0.679)。二線及以上使用克唑替尼的ORR為64.0％，DCR為86.7％;比較一線和二線及以上使用克唑替尼的ORR和DCR，差異同樣無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.114; P=0.207)，但臨床獲益傾向于一線使用。3.克唑替尼治療線數(shù)與克唑替尼無進(jìn)展生存期的關(guān)系.總體人群克唑替尼的中位PFS為8.5m(95

16、％ CI，6.8-10.1)。其中一線、二線和二線及以上接受克唑替尼治療的中位PFS分別為10.5m(95％ CI，8.6-12.4)，8.3m(95％ CI，4.7-12.0)，7.3m(95％ CI，5.7-8.8)。克唑替尼一線對比二線治療的無疾病進(jìn)展期之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=5.427，P=0.020);一線治療對比二線及以上治療的無疾病進(jìn)展期之間差異也有邊緣統(tǒng)計學(xué)意義(x2=3.243，P=0.072)。
　　單獨(dú)分

17、析入組PROFILE系列研究并接受克唑替尼治療的患者68例，中位PFS為8.5m(95％ CI，5.6-11.3)。其中一線、二線和二線及以上接受克唑替尼治療的中位PFS為分別為11.2m(95％ CI，4.8-17.6)，8.2m(95％ CI，1.7-14.7)和7.0m(95％ CI，2.1-11.9)?？诉蛱婺嵋痪€對比二線的無疾病進(jìn)展期之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=6.238，P=0.013);克唑替尼一線對比二線及以上治療的無疾