茶多糖對(duì)免疫抑制小鼠腹腔巨噬細(xì)胞與脾淋巴細(xì)胞免疫功能的影響.pdf

1、茶多糖（Tea polysaccharides，TPS）是一種受到廣泛關(guān)注的天然植物多糖，提取自茶葉，是繼茶多酚之后的又一重要的功能性成分。大量的研究表明，茶多糖具有降血糖降血脂、增強(qiáng)免疫、抗腫瘤、治療糖尿病等作用。茶多糖的結(jié)構(gòu)分析和生物活性研究，具有品種、地區(qū)的差異性，江西省婺源綠茶作為中國(guó)綠茶的代表，聞名中外，產(chǎn)量高，品質(zhì)佳，取材方便，本研究即選擇婺源粗老綠茶為研究對(duì)象，通過(guò)水提、醇沉、Sevage法除蛋白、凍干等過(guò)程，最終得到純度

2、>95％的TPS。前期大量實(shí)驗(yàn)研究表明，TPS具有降血糖血脂、調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤等生物活性，在已有研究的基礎(chǔ)上，運(yùn)用現(xiàn)代分子生物學(xué)、免疫學(xué)的理論知識(shí)和技術(shù)，從細(xì)胞、分子、基因水平等方面，探討TPS對(duì)免疫抑制小鼠腹腔巨噬細(xì)胞和脾淋巴細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用，為進(jìn)一步了解TPS的免疫藥理學(xué)作用提供理論依據(jù)。本研究的主要內(nèi)容如下：
　　以免疫抑制小鼠腹腔巨噬細(xì)胞為研究對(duì)象，探討 TPS在體外對(duì)巨噬細(xì)胞功能的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，能夠顯著地增強(qiáng)腹腔巨噬

3、細(xì)胞的吞噬功能；上調(diào)活性氧NO的分泌；提高細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌水平進(jìn)一步利用RT-PCR和Western Blot技術(shù)從細(xì)胞因子 mRNA水平、iNOS蛋白水平進(jìn)行試驗(yàn)，探究TPS對(duì)細(xì)胞因子分泌水平和活性氧的釋放是否在翻譯、轉(zhuǎn)錄水平上進(jìn)行調(diào)控的。RT-PCR法檢測(cè)TPS刺激24 hr之后腹腔巨噬細(xì)胞內(nèi)iNOS、TNF-α、IL-1βmRNA的表達(dá)水平，Western Blot法檢測(cè)到iNOS蛋白表達(dá)顯著增加，結(jié)

4、果表明，TPS可以提高腹腔巨噬細(xì)胞iNOS、TNF-α、IL-1βmRNA的表達(dá)水平，增加iNOS蛋白表達(dá)，從而表明TPS對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞的活化作用，提示其對(duì)分泌iNOS、TNF-α、IL-1β的調(diào)節(jié)作用可能發(fā)生在基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)水平。
　　以免疫抑制小鼠脾淋巴細(xì)胞為研究對(duì)象，探究TPS在體外對(duì)脾淋巴細(xì)胞免疫功能的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，TPS可以顯著促進(jìn)免疫抑制小鼠脾淋巴細(xì)胞的體外增殖，還可與ConA共同發(fā)揮協(xié)同作用，促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的增

5、殖，但對(duì)LPS誘導(dǎo)的B淋巴細(xì)胞的增殖無(wú)顯著影響；TPS顯著提高T淋巴細(xì)胞CD3+、CD4+的百分率，提高CD4+/CD8+的比值，從而抵抗環(huán)磷酰胺引起的免疫抑制；TPS可顯著促進(jìn)Th1細(xì)胞分泌細(xì)胞因子IL-2，Th2細(xì)胞分泌IL-4，還可促進(jìn)免疫抑制小鼠脾淋巴細(xì)胞分泌NO的能力，這表明TPS具有調(diào)節(jié)免疫功能的作用。
　　上述研究表明，TPS具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫的生物活性，對(duì)兩大免疫細(xì)胞有顯著的免疫調(diào)節(jié)作用，但是其具體的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制還需