UV-A誘導(dǎo)蕪菁花青素合成相關(guān)基因表達(dá)特性研究及全長(zhǎng)克隆.pdf

1、本試驗(yàn)采用光敏感型不同的津田蕪菁和赤丸蕪菁品種為試材。用黑暗和UV-A條件處理津田蕪菁和赤丸蕪菁?jí)K根，提取總RNA，利用Northern雜交技術(shù)檢測(cè)花青素合成關(guān)鍵酶基因PAL、F3H、DFR、ANS和轉(zhuǎn)錄因子MYB、UV-A受體CRY2基因的表達(dá)特性，同時(shí)分析UV-A不同處理時(shí)間對(duì)津田蕪菁?jí)K根皮中PAL、F3H、DFR、ANS、MYB、CRY2表達(dá)特性的影響。利用RACE技術(shù)對(duì)花青素合成關(guān)鍵基因F3H進(jìn)行cDNA全長(zhǎng)克隆。 主要

2、研究結(jié)果如下：(1)本研究發(fā)現(xiàn)在光敏感型試材津田蕪菁中，PAL、F3H、DFR、ANS基因的表達(dá)受UV-A誘導(dǎo)；而在光不敏感型試材赤丸蕪菁中，只有PAL、F3H、ANS基因的表達(dá)受UV-A誘導(dǎo)。 (2)UV-A處理津田蕪菁不同時(shí)間后，塊根皮中花青素合成相關(guān)基因的表達(dá)結(jié)果顯示：PAL、F3H、DFR、ANS基因的表達(dá)量與UV-A處理時(shí)間呈正相關(guān)關(guān)系，隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)基因的表達(dá)量逐漸增加。 (3)黑暗處理和UV-A處理不同

3、時(shí)間，MYB和CRY2基因的表達(dá)量沒(méi)有明顯變化。 (4)花青素生物合成的關(guān)鍵酶基因F3HcDNA全長(zhǎng)克隆的結(jié)果表明：基因全長(zhǎng)為1170bp，包含一個(gè)完整的開(kāi)放閱讀框(openreadingframe，ORF)的序列。從堿基的序列比較結(jié)果看，已克隆的基因片段為F3H基因的cDNA堿基序列，從BLASTn與BLASTx的比較結(jié)果可推斷其第10位開(kāi)始的前3個(gè)堿基ATG為翻譯的起始密碼子，編碼甲硫氨酸，1083位結(jié)束的后3個(gè)堿基TAG為