促凍殺蟲(chóng)基因工程菌的構(gòu)建.pdf

1、冰核細(xì)菌是自然界冰核活性最強(qiáng)的異源冰核,已成為一種重要的生物資源,利用冰核細(xì)菌促凍殺蟲(chóng)在理論已確鑿無(wú)疑,但由于野生型冰核細(xì)菌不能在昆蟲(chóng)腸道內(nèi)穩(wěn)定定殖以及在田間施放后易誘發(fā)作物霜凍害的原因,難以應(yīng)用野生型冰核細(xì)菌凍殺田間和倉(cāng)儲(chǔ)越冬害蟲(chóng).該研究利用轉(zhuǎn)座酶基因位于轉(zhuǎn)座單位以外的微轉(zhuǎn)座子載體,將冰核基因iceA克隆入該載體中,構(gòu)建了攜帶該基因的、具有廣泛宿主接合轉(zhuǎn)移特性和Tn5轉(zhuǎn)座功能的自殺性質(zhì)粒pTnicel.應(yīng)用實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,所構(gòu)建的基因工

2、程菌,在害蟲(chóng)腸道內(nèi)能穩(wěn)定定殖增生,能夠提高高蟲(chóng)體的過(guò)冷卻點(diǎn),凍殺害蟲(chóng)效果顯著.本項(xiàng)研究首次構(gòu)建了解攜帶冰核基因iceA的自殺性質(zhì)粒pTnicel,該質(zhì)粒可以通過(guò)接合轉(zhuǎn)移和Tn5轉(zhuǎn)座作用將iceA整合到多種革蘭氏陰性菌的染色體DNA上,該質(zhì)粒的構(gòu)建成功,將會(huì)加速中國(guó)冰核基因的應(yīng)用研究.該研究采用與國(guó)外完全不同的實(shí)驗(yàn)手段,首次獲得了生物安全型促凍殺蟲(chóng)基因工程菌.該工程菌的獲得,解決了阻礙冰核細(xì)菌促凍殺蟲(chóng)應(yīng)用中的難題,有希望創(chuàng)制出一種新型生物