濟寧青山羊子宮內(nèi)雌激素受體(ERα、β)和孕激素受體(PR)的定位及其mRNA表達的增齡性變化.pdf

1、濟寧青山羊是中國優(yōu)質(zhì)的地方山羊品種，也是世界上優(yōu)良的種質(zhì)資源。因青山羊性成熟較早，高繁殖力，四季均可發(fā)情，遺傳性穩(wěn)定，適應(yīng)性強，肉質(zhì)細膩、鮮美等優(yōu)良特性而深受廣大人民的青睞。母羊初情期一般始于60日齡，90～120日齡即性成熟。為探討濟寧青山羊出生當天至180日齡雌激素(E)和孕激素(P)含量的變化規(guī)律，雌激素受體α(ERα)、雌激素受體β(ERβ)和孕激素受體(PR)在子宮中的分布和表達規(guī)律，本試驗用放射免疫分析法檢測濟寧青山羊出生當

2、天至180日齡血清中雌激素和孕激素的含量;用SABC免疫組化法檢測ERα、ERβ和PR免疫陽性細胞在不同試驗組濟寧青山羊子宮中的分布;以GAPDH為內(nèi)參基因，qRT-PCR法對生后發(fā)育不同時期濟寧青山羊子宮中ERα、ERβ和PRmRNA表達規(guī)律進行研究。放射免疫分析法結(jié)果顯示:濟寧青山羊出生當天至180日齡均能檢測到E和P，血清中E含量出生時最多，30日齡顯著下降(P＜0.05)，雖在90日齡和180日齡分別出現(xiàn)兩個峰值，但60～180

3、日齡期間變化不大(P＞0.05);血清中P濃度在出生時較高，此后迅速下降，30～90日齡期間無顯著變化(P＞0.05)，120日齡驟然上升，與150無顯著變化(P＞0.05)，180日齡顯著上升(P＜0.01)。ERα、ERβ免疫組化和qRT-PCR結(jié)果顯示:ERα、ERβ陽性染色主要見于子宮的腔上皮細胞、腺上皮細胞、血管內(nèi)皮細胞、基質(zhì)細胞和肌層平滑肌細胞的細胞核中，偶見胞質(zhì)陽性著色;ERα、ERβ陽性細胞平均光密度在出生當天至30日齡

4、處于低水平(P＞0.05)，60日齡(初情期)開始上升，90日齡達到高峰(P＜0.05)，150～180日齡維持在一個高水平狀態(tài)，ERαmRNA的表達量在出生當天至30日齡處于低水平，60日齡開始上升，120日齡(性成熟)達到高峰，而后其表達量處于高水平狀態(tài)。ERβ mRNA的表達量在出生當天至30日齡也處于低水平，60日齡開始上升，90日齡達到高峰，此后維持在一個高水平狀態(tài)。ERα和ERβ陽性細胞光密度與其mRNA表達趨勢基本一致，但

5、ERβ低于ERα。PR免疫組化和qRT-PCR結(jié)果顯示:PR陽性染色主要見于子宮的腔上皮細胞、腺上皮細胞、基質(zhì)細胞和肌層細胞的細胞核中，偶見胞質(zhì)陽性著色，180日齡在腺上皮細胞可見PR陽性細胞大量分布;PR平均光密度出生當天較高，而后急劇下降，在30日齡處于最低水平(P＜0.05)，60日齡(初情期)明顯升高，120日齡(性成熟)出現(xiàn)第一個高峰，150日齡略微降低(P＞0.05)，180日齡(性成熟之后)出現(xiàn)第二個高峰;PR mRNA從