羽衣甘藍(lán)主要性狀遺傳規(guī)律研究及親緣關(guān)系的RAPD分析.pdf

1、羽衣甘藍(lán)是十字花科蕓薹屬甘藍(lán)種的變種。為了探明羽衣甘藍(lán)主要性狀的遺傳規(guī)律及各引進(jìn)品種間的親緣關(guān)系，從而定向培育出理想的羽衣甘藍(lán)新品系，實(shí)驗(yàn)共分兩部分進(jìn)行：首先通過(guò)引進(jìn)品種連續(xù)兩代自交，有代表性品種間的正反交，以及回交驗(yàn)證，研究羽衣甘藍(lán)葉形和葉色性狀的遺傳規(guī)律；然后用RAPD方法分析了羽衣甘藍(lán)品種間的親緣關(guān)系。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 羽衣甘藍(lán)葉形性狀是由細(xì)胞核中等位基因控制；裂葉對(duì)圓葉、裂葉對(duì)皺葉、皺葉對(duì)圓葉性狀表現(xiàn)為不完全顯性

2、；裂葉的羽裂程度有微效修飾基因參與。 羽衣甘藍(lán)的葉色性狀具有明顯的數(shù)量性狀特征，推斷羽衣甘藍(lán)葉色性狀遺傳表現(xiàn)為紅色對(duì)粉色、粉色對(duì)白色、紅色對(duì)白色為不完全顯性。 實(shí)驗(yàn)確定適合羽衣甘藍(lán)基因組RAPD擴(kuò)增的20μl反應(yīng)體系為：2μl的10×PCR反應(yīng)緩沖液；2.0mmol/LMgCl<,2>；0.4mmol/LdNTP；0.4μmol/L引物；稀釋10倍的總DNA5μl；1,5UTaq酶；滅菌的超純水補(bǔ)齊體積到20μl。

3、 適合羽衣甘藍(lán)基因組RAPD擴(kuò)增的反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性5min；94℃變性30sec，37℃退火30sec，72℃延伸1min，40個(gè)循環(huán)；最后72℃延伸7min。 用優(yōu)化后的RAPD反應(yīng)體系，從64個(gè)隨機(jī)引物中篩選出10條穩(wěn)定、清晰、條帶豐富且具較高多態(tài)性的引物，用于羽衣甘藍(lán)品種間親緣關(guān)系分析。10個(gè)引物共擴(kuò)增出了92條帶，其中65條具有多態(tài)性，占擴(kuò)增條帶總數(shù)的70.6％。 RAPD擴(kuò)增圖譜經(jīng)統(tǒng)計(jì)軟件分析，14個(gè)

4、品種的歐氏遺傳距離從2.44949到6.08276；遺傳距離最近的為兩個(gè)皺葉品種，最遠(yuǎn)的是圓葉品種“北海道圓葉粉心”和系列皺葉品種。 在D值為4．50處，14個(gè)品種被分為4類。第一類4個(gè)圓葉品種，第二類2個(gè)裂葉和2個(gè)圓葉品種；第三類5個(gè)皺葉品種；第四類為1個(gè)皺葉品種，田間表現(xiàn)為皺葉、心葉白色。 實(shí)驗(yàn)首次系統(tǒng)地分析了羽衣甘藍(lán)主要性狀的傳遞規(guī)律，首次利用RAPD手段分析了羽衣甘藍(lán)各品種間的親緣關(guān)系，為今后雜交組合的配置提供理