黃瓜花葉病毒干擾番茄花葉病毒在番茄中壞死的機制研究.pdf

1、黃瓜花葉病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)和番茄花葉病毒(Tomatomosaic virus,ToMV)是侵染番茄(Solanum lycopersicum)的兩種主要病毒。ToMV-N5為2005年本實驗室于上海番茄分離獲得,可引起合作903番茄產(chǎn)生頂端壞死,而使中蔬4號番茄表現(xiàn)花葉癥狀。前期研究結(jié)果表明,CMV-Fny接種后,復合接種ToMV-N5,在合作903番茄上表現(xiàn)干擾作用,在中蔬4號番茄上表現(xiàn)協(xié)生作

2、用：該現(xiàn)象與番茄中Tm2基因型有關(guān)。本文研究CMV-Fny和ToMV-N5的互作在幾個番茄品種上的癥狀表現(xiàn)及其與Tm2基因型的關(guān)系,以及CMV-Fny和ToMV-N5在合作903番茄上的干擾作用對Tm2基因、miRNAs表達量的影響,為研究CMV-Fny干擾ToMV-N5在番茄中壞死的分子機制提供依據(jù)。主要研究內(nèi)容包括：
　　 ⑴采用單獨和復合接種的方法,研究CMV-Fny和ToMV-N5在合作903番茄及其父、母本和Money

3、 maker番茄上的癥狀表現(xiàn),結(jié)果顯示,兩種病毒的復合侵染在雜交種合作903番茄上表現(xiàn)為干擾作用,在合作903番茄父、母本和Moneymaker番茄上表現(xiàn)為協(xié)生作用。
　　 ⑵對合作903番茄及其父、母本植株中Tm2基因進行克隆測序,結(jié)果顯示三個番茄品種的Tm2基因型分別為:Tm.22/tm-2、tm-2/tm-2和Tm-22/Tm-22。
　　 ⑶采用熒光定量PCR方法,研究CMV-Fny和TOMV-N5的單獨和復合侵

4、染對合作903番茄Tm2基因表達量的影響,結(jié)果顯示,CMV-Fny的單獨侵染不引起Tm2基因表達量的變化,ToMV-N5的單獨侵染相對于它與CMVoFny的復合侵染,Tm2基因表達量顯著增加。
　　 ⑷采用熒光定量PCR方法,根據(jù)番茄miRNAs芯片雜交結(jié)果,選擇與番茄形態(tài)發(fā)育、激素應答和代謝相關(guān)的10條miRNAs(miR156、miR159、miR160、miR162、miR164、miR165/166、miR167、miR