飛蝗觸角中氣味分子結(jié)合蛋白的定位與結(jié)合特性.pdf

1、中國農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文飛蝗觸角中氣味分子結(jié)合蛋白的定位與結(jié)合特性姓名：金鑫申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治指導(dǎo)教師：張龍;張善干20030601A b s t r a c tT h ep u r i f i c a t i o no f p u t a t i v eo d o r a n t - b i o d i n gp r o t e i n sr o a P s ) f r o ma n t e n n a eo

2、fL o c u s t a m i g r a t o r i am a n i l e n s i sw a sp e r f o r m e d w i t hg e lf i l t r a t i o n ，H P L Ca n d e l e c t r o p h o r e s i s T h e g e n e r a lp r o p e r t i e so f t h ep r o t e i n s w e r

3、 e c h a r a c t e r i z e d ．L o c a l i z a t i o n o f t h e p u t a t i v e O B P s w a s c o n d u c t e d b y u s i n gi m m u n o c y t o c h e m i c a l t e c h n i q u e sa f t e ro b s e r v a t i o n o nu l t

4、r a s t m e t u r e o f a n t e n n a ls e n s i l l a ．T h e r e s u l t s a r e a sf o l l o w i n g s ：1 ．T h cp u t a t i v e O B P sw e r ep u r i f i e d t h r o u g h g e lf i l t r a t i o n ．a(chǎn) n i o n - e x c h

5、a n g e c h r o m a t o g r a p h y a n de l e c t r o p h o r e s i s ．T h e s o l u b l ep u t a t i v eO B P so n l y p r e s e n t i n g i n t h ea n t e n n a e a r el o w e rm o l e c u l ew e f g h t ( a b o u t1

6、5k D a ) ．2 ．T h e a n t i s e r aa g a i n s tt h e p u t a t i v eO B P s w e r e o b t a i n e dt h r o u g hi O e c f i o n o f t h e p u r i f i e dp r o t e i n si n t or a b b i t s ．T h er e s u l t s o f W e s t

7、 e mb l o tt e s t si n d i c a t e d t h a tt h e a n t i s e r as p e c i a l l yg r o s s - r e a c t e dw i t ht h ea n t e n n a l p r o t e i n s ( a b o u t 1 5 k D am o l e c u l a rw e i g h t ) a n dr e c o m b

8、 i n a n t O B Po fL ．m i g r a t o r i am a n i l e n s i s3 ．T h e p u t a t i v e o B P s b o u n d N —p h e n y l - 1 一n a p h t h y l a m i n 《1 - N P N ) i n f l u o r e s c e n t b i n d i n g a s s a y s ．A d d i

9、 t i o no f t h el i g a n dp r o d u c e d a s i g n i f i c a n t q u e n c h i n go f t h e p u t a t i v eO B P s ’f l u o r e s c e n c e ．I n t h ep r e s e o c e o f t h ep r o t e i n s ．t h ee m i s s i o n w a

10、v e l e n g t h o f l - N P N w a s b l u e - s h i f t e d f r o m 4 8 0 m t oa b o u t4 0 7 n m ．4 ． T h e u l t r a s t r u c t u r eo f s e n s i l l ab a s i c o n i c a ( s u b t y p e A a n dB ) ，S ．t r i c h o d

11、e a , s ．c o e l o c o n i c a ( s u b t y p eAa n d B 1a n d s ．c h a e t i c a w a s o b s e r r e d ．5 ，I m m u n o c y t o c h e m i c a ll o c a l i z a t i o nd e m o n s t r a t e d t h a tt h e p u t a t i v e O

12、B P sw e r el a h e l l e di n t h el y m p ho f s e 舯s i l l ab a s i c o n i c a , s ．t r i c h o d aa n ds ．e e o l o c o n i c a ，T h ec u t i c u l a rm i c r o - p o r e sa n d c h a n n e l sa l s oc o n t a i n e

13、 d t h e s ep r o t e i n s ．T h e d a m a g et oc r o p sc a u s e db y 工．m i g r a t o r i a m a n i l e m i s i sm a i n l yd u e t oi t ’sh e h a v i o u r sw h i c h h a v ea c l o s er e l a t i o n s h i p w i t h

14、 o l f a c t o r ys e n s a t i o n ．S t u d i e s o n l o c a l i z a t i o n a n db i n d i n gp r o p e r t i e s o ft h ep u t a t i v e0 B P s i n s e n s i l l aw i l lh ef a v o u r e dt ot h ed e f i n i t i o no

15、 f O B P s ’f u n c t i o n s o nb a h a v i o u r so f l o c u s ts ot h a tw ec a n e x p l o i tn e ww a y f o r s u s t a i n a b l em a n a g e m e n to f t h e p e s t ．K e yw o r d s ：L o c u s t a m i g r a t o r