耐鎘真菌的篩選及其鎘吸附特性研究.pdf

1、“鎘污染”已成為全球性環(huán)境問題，給人類健康造成了巨大危害，稻田土壤鎘污染問題突出，采用微生物修復(fù)方法成本低，無二次污染等，前景廣闊。篩選具有耐鎘特性的稻田土壤真菌，為獲得既能適應(yīng)高鎘環(huán)境又具高鎘吸附能力的微生物提供資源，進(jìn)而為鎘污染水稻田生物修復(fù)提供良好菌種，對(duì)鎘污染稻田土壤修復(fù)和保障糧食安全具有重要意義。
　　本研究從常寧、衡東鎘污染稻田采集土樣，從土壤中分離篩選得到耐鎘真菌，對(duì)其中最佳的兩株進(jìn)行鑒定，并對(duì)其鎘吸附能力、重金屬耐

2、受性、生長條件和對(duì)水稻生長和鎘脅迫水稻生長的影響進(jìn)行了研究：
　?。?）耐鎘真菌篩選與鑒定
　　采用Cd2+濃度梯度壓力馴化法，從采集的鎘污染土壤中分離篩選得到耐鎘真菌，從中選擇鎘耐性最強(qiáng)且形態(tài)不同的兩株作為研究對(duì)象，分別編號(hào)為CN35和HD228，并進(jìn)行菌種鑒定。綜合菌株形態(tài)特征和ITS、BenA基因序列系統(tǒng)進(jìn)化分析結(jié)果，分別初步鑒定為青霉屬(Penicillium sp.)、木霉屬(Trichoderma sp.)；

3、r>　?。?）耐鎘真菌鎘吸附特性和重金屬耐性研究
　　耐鎘真菌CN35在Cd2+初始濃度為200 mg/L的PDA液體培養(yǎng)基中Cd吸附率可達(dá)83.56％；最高鎘耐受濃度為45 mM，其他幾種常見重金屬Pb、Zn、Cu對(duì)CN35的最低抑制濃度（MIC）分別為>80、>80、>10 mM；CN35對(duì)Cd2+脅迫的響應(yīng)外在表現(xiàn)為：菌落直徑隨重金屬濃度升高而減??；Cd2+濃度≥2 mM時(shí)，菌落在CYA平板上菌落由黃色變?yōu)榧t色，Cd2+濃度

4、≥5 mM時(shí)，菌落在PDA平板上由綠色變?yōu)榧t色，隨著Cd2+濃度升高，各平板上菌落紅色加深；菌落形態(tài)隨Cd2+濃度變化而改變，20 mM左右，菌落表面形成突起。
　　HD228在Cd2+初始濃度為100 mg/L的培養(yǎng)基中Cd吸附率可達(dá)79.88%；最高鎘耐受濃度為22 mM；Pb、Zn、Cu對(duì)HD228的最低抑制濃度（MIC）>80、>80、>30mM。HD228菌落直徑與重金屬濃度呈負(fù)相關(guān)，20 mM時(shí)菌落不規(guī)則。
　　

5、（3）影響耐鎘真菌生長和耐鎘的條件
　　CN35能在pH4-8、溫度24-37℃條件下良好生長，最適生長和耐鎘pH為4、溫度為30℃；HD228能在pH4-8、溫度20-35℃條件下良好生長，最適生長和耐鎘pH為5、溫度為30℃。溫度和pH均不影響兩者的耐鎘能力。
　?。?）耐鎘真菌對(duì)水稻和鎘脅迫水稻生長的影響
　　菌株CN35、HD228適量發(fā)酵液對(duì)水稻種出苗、幼苗生長無抑制作用，CN35、HD228發(fā)酵液使用劑量4