豬糞中沙門氏菌的分離鑒定及體外抑菌方法的研究.pdf

1、本文從新疆某豬場的小豬、種公豬、哺乳母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬、后備母豬的豬糞中篩選得到五株沙門氏菌，并對其進(jìn)行生理生化和血清學(xué)鑒定；選擇抗生素、中草藥及益生乳酸桿菌發(fā)酵液對分離鑒定出的沙門氏菌進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)。在沙門氏菌藥敏性實(shí)驗(yàn)中，選用圓紙片擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)法(Kirby-Baueer Dise Diffusion)，選擇常用12種抗生素，測定其對沙門氏菌抑菌效果：在中草藥抑菌實(shí)驗(yàn)中，選擇常用15味中草藥煎劑及6種復(fù)方制劑，采用試管二倍稀釋法，測定其最小抑

2、菌濃度(MIC)；在乳酸菌代謝產(chǎn)物的抑菌實(shí)驗(yàn)中，利用牛津杯法(Oxford Cupmethod)，測定益生乳酸菌代謝產(chǎn)物對沙門氏菌的抑菌效果，初步研究了乳酸菌代謝產(chǎn)物的特性：在厭氧環(huán)境的抑菌試驗(yàn)中，研究益生乳酸菌協(xié)同中草藥方劑對豬腸道沙門氏菌的抑菌效果。 結(jié)果表明： (1)從新疆某豬場的小豬、種公豬、哺乳母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬、后備母豬的豬糞中分離鑒定的五株沙門氏菌分別為：乙型副傷寒沙門氏菌(SaImonlla paratyph

3、i B)、斯坦利沙門氏菌(Salmonlla stanley)、雷根特沙門氏菌(Salmonella regent)、德爾卑沙門氏菌(Salmonlladerby)、鼠傷寒沙門氏菌(Salmonella typhimurium)。 (2)在抗生素的抑菌試驗(yàn)中，從豬糞中分離鑒定出的5株沙門氏菌，都有不同程度的耐藥現(xiàn)象存在：所試驗(yàn)的12種抗生素中，5株沙門氏菌對阿米卡星，頭孢克肟，頭胞噻肟這三種藥物高度敏感；對慶大霉素、利福平、多粘

4、菌素B等藥物耐藥；對新霉素的耐藥率為60％，對氧氟沙星的耐藥率均為40％，對土霉素、利特靈、頭孢三嗪、硫酸粘桿菌素的耐藥率為20％。 (3)15味單味中草藥對5株沙門氏菌的抑菌效果：貫眾對所有沙門氏菌的抑菌作用最強(qiáng)：黃芪、苦參、連翹、白術(shù)、葛根，這幾種藥物的抑菌作用較強(qiáng)；黃柏，山萸肉，刺五加，石榴皮這四種藥物有一定的抑菌作用；野菊花、陳皮、甘草、梔子的抑菌作用較弱，而夏枯草抑菌作用最弱。6種中草藥復(fù)方合劑對5種沙門氏菌的抑菌效果

5、：復(fù)方Ⅱ最強(qiáng)；其次為復(fù)方Ⅴ，抑菌效果較強(qiáng)；再次為復(fù)方Ⅰ、復(fù)方Ⅲ、復(fù)方Ⅳ及復(fù)方Ⅳ均有一定的抑菌作用。而且6種中草藥復(fù)方合劑的抑菌效果都強(qiáng)于單味草藥的抑菌效果。 (4)在益生乳酸菌發(fā)酵液對沙門氏菌的抑菌試驗(yàn)中，從5株乳酸菌中篩選出1株既耐酸又耐膽鹽的益生乳酸菌lact2，提取其發(fā)酵液進(jìn)行抑菌試驗(yàn)，結(jié)果表明益生菌1act2發(fā)酵上清液對5株沙門氏菌均有較好的抑菌作用；1act2的代謝產(chǎn)物在pH值2.0時(shí)抑菌活性最強(qiáng)，pH值達(dá)6.0以上喪

6、失活性，并且代謝產(chǎn)物的抑菌物質(zhì)對熱穩(wěn)定，其活性不被過氧化氫酶，蛋白酶K，胃蛋白酶和胰蛋白酶酶等破壞。 (5)在厭氧環(huán)境的抑菌試驗(yàn)中，可得出中草藥復(fù)方Ⅱ和乳酸菌發(fā)酵液均能有效的抑制沙門氏菌，并且中草藥復(fù)方Ⅱ協(xié)同益生乳酸菌lact2的抑菌效果強(qiáng)于任何一單方面作用的抑菌效果；中草藥復(fù)方Ⅱ可以促進(jìn)益生乳酸菌的增殖，因此說明它具有益生元和藥理的雙重作用；中草藥復(fù)方Ⅱ協(xié)同乳酸菌lact2對5株沙門氏菌的抑菌效果強(qiáng)弱依次為：乙型副傷寒沙門氏菌>德爾卑