甘薯莖尖的超低溫保存及其再生植株的研究.pdf

1、以往常用的甘薯種質(zhì)資源保存方法都有著各自的局限性，而超低溫冷凍保存技術(shù)在甘薯種質(zhì)資源保存上的研究和應(yīng)用鮮有報(bào)道。相對(duì)于以往甘薯種質(zhì)資源的保存方法，超低溫冷凍保存技術(shù)有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),并有著廣闊的應(yīng)用前景，它不僅可以保存種質(zhì)的遺傳穩(wěn)定性，而且能清除種質(zhì)內(nèi)的病原物，強(qiáng)化其生活力。本研究通過優(yōu)化包埋玻璃化法冷凍技術(shù)的主要影響因子，對(duì)甘薯莖尖超低溫保存的過程進(jìn)行了系統(tǒng)的優(yōu)化配置，獲得了甘薯主栽品種徐薯18號(hào)和濟(jì)薯21號(hào)適宜的超低溫冷凍條件，并進(jìn)一

2、步探索莖尖的再生方法。具體做法如下:
　　 1.采用正交試驗(yàn)對(duì)超低溫保存體系進(jìn)行了優(yōu)化，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:玻璃化溶液處理時(shí)間為主要影響因素.而6-BA濃度為0.5mg·L-1的培養(yǎng)基上的長度為1-1.5mm的莖尖，PVS2處理90min,超低溫保存效果最好。
　　 2.做單因子試驗(yàn),利用正交試驗(yàn)結(jié)果，只變化單因子，其它處理步驟按最佳組合進(jìn)行系統(tǒng)優(yōu)化:
　　 (1)在以正交試驗(yàn)結(jié)果為基礎(chǔ)，研究各單因子對(duì)超低溫保存體系的

3、影響，結(jié)果如下:不同的6-BA濃度水平試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),6-BA濃度為0.5mg·L-1的MS培養(yǎng)基上生長出來的側(cè)芽，經(jīng)冷凍后均得到較高的存活率。
　　 (2)在不同大小的莖尖試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn):1-1.5mm大小的莖尖成活率可達(dá)到80％，而＜1mm和1.5-3mm莖尖成活率則低于50％。
　　 (3)在不同玻璃化溶液處理時(shí)間試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn):未經(jīng)PVS2處理的和處理30min的幾乎全部死亡，而處理90min的莖尖存活率達(dá)80％以上，取得了