多孔鉭修復兔節(jié)段性骨缺損“鉭-骨”界面成骨的組織形態(tài)學變化.pdf

1、目的：本實驗通過X線、組織形態(tài)學（石蠟切片、硬組織切片、掃描電鏡）、Micro-CT觀察筋膜包裹的國產(chǎn)多孔鉭植入骨缺損后“鉭—骨”界面的生物相容性和骨修復能力，探討筋膜包裹的國產(chǎn)鉭-骨界面的成骨能力，從而為國產(chǎn)多孔鉭在骨缺損修復、關節(jié)置換及骨性融合的臨床應用提供實驗依據(jù)。
　　方法：1、材料準備及分組：將多孔鉭材料制成直徑為4mm，長20mm的圓柱體，選取45只6月齡新西蘭大白兔,隨機抽取分為3組,筋膜鉭組：多孔鉭+筋膜包裹組18

2、只，鉭組：單純多孔多孔鉭組18只，空白對照組：9只。2、手術步驟及術后X線：取右側(cè)前臂橈側(cè)中段制作橈骨骨缺損（20 mm），將內(nèi)植物嵌壓植入缺損區(qū)?？瞻捉M不植入內(nèi)植物。術后4、8、16周投照右上肢正側(cè)位DR片。3、取材及大體觀察：各組實驗動物分別于術后4、8、16周處死，取材。行形態(tài)學觀察、硬組織切片觀察、掃描電鏡、Micro-CT；三個時間點空白對照組各處死3只行形態(tài)學觀察。觀察術后4、8、16周三個時間點各組骨缺損部位的大體愈合情況

3、，評估各組術后16周時的修復效果。4、多孔鉭-骨界面組織石蠟切片常規(guī)組織學染色觀察及毛細血管計數(shù)：光學顯微鏡下觀察植入材料與宿主骨界面新骨生長情況。觀察材料內(nèi)部新生骨再生情況及空白對照組骨缺損處情況及毛細血管。5、硬組織切片觀察：光學顯微鏡下觀察纖維組織的分布及成骨細胞生長、分化、分布情況。筋膜鉭組及多孔鉭組隨機選取術后16周切片6張，采用IPP6.0顯微圖象分析軟件對骨組織切片進行骨組織形態(tài)分析計量。6、植入物界面掃描電鏡觀察：掃描電

4、鏡觀察鉭—骨界面毛細血管再生情況、骨組織及纖維組織生長情況。7 Micro-CT評估：于術后8、16周，筋膜鉭組和鉭組各隨機選取3只標本，在一定的條件下對多孔鉭及周圍骨質(zhì)進行 micro-CT掃描，并對16周標本行三維重建并行骨形態(tài)計量學分析，觀察并分析各組中的界面及周圍的骨質(zhì)情況。
　　結(jié)果：1、影像學觀察：于術后4、8、16周三個時間將筋膜鉭組和鉭組實驗兔X線觀察見材料與骨質(zhì)交接界處有不同程度的骨膜反應。兩組材料與受體骨界面之

5、間可以觀察到低密度新生骨，沒有觀察到間隙、透明帶及骨質(zhì)溶解。2、大體觀察：術后4周筋膜鉭組和鉭組材料表面少量骨樣組織形成，空白對照組標本缺損處清晰；術后8、16周筋膜鉭組缺損部位逐漸被新生骨組織覆蓋；鉭組缺損部位也逐漸被新生骨組織覆蓋，修復程度不及筋膜鉭組，空白對照組標本缺損處未能修復，逐漸被纖維組織填充。3、多孔鉭-骨界面組織石蠟切片常規(guī)組織學染色觀察及毛細血管計數(shù)：術后筋膜鉭組及多孔鉭組逐漸在鉭-骨界面處形成新生的骨性骨小梁，新生骨

6、組織逐步成熟。空白組骨缺損始終存在，洞壁可見纖維膜。同一時間點小血管數(shù)量分析顯示：各時間點筋膜鉭組小血管數(shù)量均顯著高于鉭組（P<0.05)。4、硬組織切片觀察：術后4、8、16周，筋膜鉭組和鉭組多孔鉭界面新生骨及骨組織逐漸增加，并逐漸出現(xiàn)新生骨小梁并向多孔鉭孔隙內(nèi)生長，骨組織與多孔鉭接觸趨于緊密，骨缺損區(qū)域逐漸被新生骨樣組織覆蓋，新生骨組織與多孔鉭結(jié)合越發(fā)緊密。術后16周兩組標本經(jīng)過骨組織計量學分析結(jié)果表明：筋膜鉭組及鉭組骨小梁數(shù)目（T

7、b.N）差異在兩組間未發(fā)現(xiàn)不同（P>0.05)。筋膜鉭組骨體積分數(shù)（BV/TV）高于鉭組（P<0.05)。筋膜鉭組骨小梁厚度（Tb.Th）高于鉭組(P<0.05)。筋膜鉭組骨小梁分離度（Tb.Sp）低于鉭組（P<0.05)。5掃描電鏡觀察：術后4、8、16周，筋膜鉭組和鉭組掃描電鏡觀察材料表面鈣鹽沉積及新生骨及成骨細胞數(shù)量逐漸增多，分泌的胞外基質(zhì)逐漸將鉭覆蓋，孔隙內(nèi)長入的新生骨組織逐漸增多。6、Micro-CT掃描觀察：術后8、16周筋

8、膜鉭組多孔鉭與宿主骨之間的骨性連結(jié)逐漸變多，新生骨痂逐漸逐漸向缺損部位延伸，并與多孔鉭形成整合。術后16周兩組標本經(jīng)過骨組織計量學分析結(jié)果表明：筋膜鉭組及鉭組骨小梁數(shù)目（Tb.N）差異在兩組間未發(fā)現(xiàn)不同（P>0.05)。筋膜鉭組骨體積分數(shù)（BV/TV）高于鉭組(P<0.05)。筋膜鉭組骨小梁厚度（Tb.Th）高于鉭組（P<0.05)。筋膜鉭組骨小梁分離度（Tb.Sp）低于鉭組(P<0.05)。
　　結(jié)論：1、帶蒂筋膜瓣可加速多孔鉭