枯草芽胞杜菌TR21對(duì)香蕉枯萎病生防機(jī)制研究.pdf

1、為了加快對(duì)香蕉枯萎病的防控菌株及機(jī)理的研究,本文對(duì)該病具有初步防治效果的芽胞桿菌菌株TR21開展了鑒定、生物學(xué)特性、產(chǎn)酶能力、抗菌作用及其成分等研究,在溫室測(cè)定了菌株TR21對(duì)香蕉枯萎病的防治效果、在香蕉體內(nèi)和根際的定殖情況、對(duì)香蕉抗病相關(guān)酶活性的影響以及抗病相關(guān)基因表達(dá)的影響,為該生防菌株的進(jìn)一步研究和應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。其結(jié)果如下:
　　 1、利用API50 CH系統(tǒng)對(duì)菌株TR21的鑒定顯示其與枯草芽胞桿菌(Bacillussu

2、btilis)的相似性為90.3％；通過結(jié)合16S rDNA、gyrA和gyrB基因序列的系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果也鑒定該菌為枯草芽胞桿菌。
　　 2、菌株TR21生長(zhǎng)的pH值范圍為.5.0～9.0,最適pH值為6.0,在所測(cè)定的碳、氮源中,葡萄糖和酵母提取物分別為最佳營(yíng)養(yǎng)。NB培養(yǎng)基測(cè)定的生長(zhǎng)曲線顯示14 h內(nèi)該菌株生長(zhǎng)達(dá)到穩(wěn)定期。該菌株在NB培養(yǎng)基中產(chǎn)胞外蛋白酶而不產(chǎn)幾丁質(zhì)酶,在香蕉組織浸提液培養(yǎng)基中既不產(chǎn)蛋白酶又不產(chǎn)幾丁質(zhì)酶?？咕?/p>

3、譜研究顯示該菌株在平板上對(duì)包括多株香蕉枯萎病菌在內(nèi)的多種植物病原真菌具有廣譜抗性。菌株TR21胞外物質(zhì)抑菌試驗(yàn)結(jié)果表明,蛋白和脂肽粗提物均對(duì)香蕉枯萎病菌具有拮抗活性。
　　 3、在溫室利用傷根和葉腋接種TR21發(fā)酵液開展了香蕉枯萎病盆栽防效測(cè)定,在接種香蕉枯萎病病原菌后40 d的防治效果分別為(81.10±2.80)％和(79.32±4.49)％。采用傷根和灌根法接種,標(biāo)記菌株在香蕉體內(nèi)及根際的定殖動(dòng)態(tài)總體呈下降趨勢(shì)。采用葉腋法

4、接種,標(biāo)記菌株僅能在葉片中定殖,其定殖動(dòng)態(tài)表現(xiàn)為“由升到降”趨勢(shì)。因此,3種方式接種后菌株TR21均能夠在香蕉體內(nèi)定殖和傳導(dǎo),且在香蕉根表和根際土壤中有較好的定殖能力。推測(cè)誘導(dǎo)系統(tǒng)抗性可能是葉腋接種菌株TR21防治香蕉枯萎病的主要機(jī)制。
　　 4、比較了TR21發(fā)酵液、菌體、上清和NB培養(yǎng)基分別處理香蕉后,香蕉根系內(nèi)PPO、POD和PAL活性的變化,發(fā)現(xiàn)以上處理均比無菌水對(duì)照高,但接種RR21發(fā)酵液、菌體的3種酶活性均明顯高于接

5、種上清和NB的處理?？梢耘袛郥R21發(fā)酵液中主要有效誘導(dǎo)組分為菌體。灌根接種TR21菌體可以引起香蕉葉片中PPO、POD和PAL活性升高,推測(cè)誘導(dǎo)系統(tǒng)抗性可能是菌株TR21防治香蕉枯萎病的機(jī)制之一。
　　 5、利用半定量RT-PCR法,研究了接種菌株TR21后對(duì)香蕉根系4種抗病相關(guān)基因表達(dá)的影響。結(jié)果表明,PAL、POD、PR-3、PR-1基因在接種后均表達(dá)上調(diào),但PAL、POD基因的表達(dá)增幅明顯高于PR-3、PR—1基因。PA