蕓薹屬硫代葡萄糖苷相關(guān)基因的ACGM標記.pdf

1、硫代葡萄糖苷是廣泛存在于十字花科植物中的含硫次級代謝產(chǎn)物。硫代葡萄糖苷以及它們的衍生產(chǎn)物在植物防御、人類的營養(yǎng)和抗癌方面具有特殊的作用。 現(xiàn)在一般接受的硫代葡萄糖苷生物合成的模式主要包括3個主要階段：(1)側(cè)鏈的延長；(2)糖苷核心的合成；(3)側(cè)鏈的二次修飾。目前已經(jīng)在擬南芥中檢測出有關(guān)這3個階段生物合成的相關(guān)基因和酶的特性。 本實驗選取蕓薹屬代表植物西蘭花，油菜，甘藍，大白菜為試驗材料，對硫代葡萄糖苷合成核心途徑中的

2、的關(guān)鍵基因CYP79A2進行ACGM標記。選擇蕓薹屬作為實驗對象不僅僅因為蕓薹屬蔬菜中普遍含有硫苷代葡萄糖苷且含量豐富，更重要的是蕓薹屬蔬菜在我國廣泛栽培，具有可觀的經(jīng)濟價值。 本實驗根據(jù)擬南芥中已經(jīng)鑒定出的硫代葡萄糖苷結(jié)構(gòu)基因CYP79A2的保守序列設(shè)計特異引物，并以選取材料總基因組DNA為模板進行PCR反應(yīng)，并對PCR產(chǎn)物進行測序及分析。為了克服基因表達豐度低等問題，加大了DNA模板的使用量，減少了引物的使用量，適當(dāng)提高退火