納米羥基磷灰石負(fù)載埃博霉素及其抗腫瘤活性研究.pdf

1、HA是一種生物相容性良好的無機(jī)材料，比表面積大，在生物醫(yī)藥行業(yè)有廣闊前景。HA作為藥物輸送系統(tǒng)遞送藥物到達(dá)病變位點(diǎn)，可以起到緩釋藥物和持續(xù)給藥的作用，而且可以減小對(duì)正常細(xì)胞的毒副作用并提高藥物利用率。埃博霉素作為一種新型的抗癌藥物，其抗癌機(jī)制與紫杉醇相似，其副作用更小，藥效更高，約是紫杉醇的5~10倍。目前，埃博霉素B及其它衍生物已用于臨床試驗(yàn)研究，但是將埃博霉素依靠緩釋系統(tǒng)負(fù)載還尚未有報(bào)道，研究納米緩釋系統(tǒng)對(duì)埃博霉素負(fù)載及其細(xì)胞毒性的

2、影響，為臨床應(yīng)用打下基礎(chǔ)。
　　本文主要從以下幾個(gè)方面進(jìn)行研究：
　　1.采用共沉淀法制備HA，并以γ-氨丙基三乙氧基硅烷（APTES）作為改性劑，改善其團(tuán)聚程度，然后通過SEM、TEM、XRD、FTIR進(jìn)行表征。結(jié)果表明，制備的HA結(jié)晶完整，改性后未影響HA的晶體結(jié)構(gòu)，而且HA聚團(tuán)現(xiàn)象有所改善，HA粒徑長(zhǎng)約70-90 nm，寬約20 nm。
　　2.將埃博霉素負(fù)載到HA表面，采用HPLC法檢測(cè)負(fù)載率，研究了溶劑、埃博

3、霉素初始濃度、負(fù)載時(shí)間對(duì) HA搭載埃博霉素的影響。結(jié)果表明乙酸乙酯為最佳溶劑，埃博霉素初始濃度為1.2 g/L時(shí)負(fù)載率最高，負(fù)載3 h達(dá)到吸附平衡，HA吸附飽和。然后對(duì)HA-Epothilone緩釋埃博霉素的能力進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)埃博霉素A的緩釋率為85％，埃博霉素B的緩釋率為96%。
　　3.將HA-Epothilone和Epothilone作用于宮頸癌Hela細(xì)胞，觀察對(duì)Hela細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的影響及細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果表明，HA-E

4、poA、HA-EpoB的細(xì)胞毒性均比游離藥物EpoA、EpoB高，EpoA、HA-EpoA、EpoB、HA-EpoB的IC50分別為14.3 ng/mL，11.8 ng/mL，10.2 ng/mL，8.7 ng/mL。通過Annexin V-FITC/PI雙染法分析Hela細(xì)胞凋亡，HA-EpoA和HA-EpoB比游離藥物細(xì)胞凋亡比率高，細(xì)胞毒性強(qiáng)。通過TEM觀察到細(xì)胞核膜消失，核仁裂解，細(xì)胞膜上的纖維絨毛消失，出現(xiàn)許多凸起，脫落成為凋