基于化學(xué)發(fā)光與光致電化學(xué)技術(shù)檢測(cè)巰基化合物與DNA的研究.pdf

1、谷胱甘肽（GSH）是生物體內(nèi)最重要的小分巰基化合物，廣泛存住于各種組織和細(xì)胞當(dāng)中，在維持生物體的新陳代謝、細(xì)胞內(nèi)的氧化還原環(huán)境以及蛋白質(zhì)的合成過(guò)程中具有重要的作用。脫氧核糖核酸（DNA）是生物體內(nèi)遺傳信息的載體，DNA特定序列的快速檢測(cè)以及DNA堿基突變的研究對(duì)于疾病的早期診斷和治療具有重要的意義。
　　 本論文主要是將化學(xué)發(fā)光技術(shù)、光致電化學(xué)分析法應(yīng)用于GSH和DNA的檢測(cè)，研制出新型的化學(xué)發(fā)光探針和光致電化學(xué)生物傳感器，實(shí)現(xiàn)

2、了GSH和DNA的高靈敏檢測(cè)，為早期的臨床診斷提供了理論研究基礎(chǔ)。論文的士要內(nèi)容有以下幾個(gè)方面：
　　 1、合成了一種新型的化學(xué)發(fā)光探針-雙核銅配合物Cu2L2，并用元素分析、核磁共振、質(zhì)譜等方法對(duì)配體和配合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征。通過(guò)紫外可見(jiàn)吸收光譜研究發(fā)現(xiàn)，GSH可以與Cu2L2發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)作用，破壞了Cu2L2的類過(guò)氧化氫酶結(jié)構(gòu)，從而影響Cu2L2的催化能力，導(dǎo)致Luminol-H2O2體系的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度明顯減弱。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，實(shí)

3、現(xiàn)了GSH的靈敏檢測(cè)，線性范圍為8.0×10-9～2.0×10-7mol/L，檢測(cè)限為1.8×10-9mol/L（3σ）。此外，我們對(duì)一些能夠影響化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度的離子和物質(zhì)進(jìn)行了干擾研究，考察了探針Cu2L2對(duì)不同巰基化合物的選擇性。同時(shí)將該方法應(yīng)用于小白鼠淋巴白血病細(xì)胞P388巰基提收物的檢測(cè)，探針Cu2L2對(duì)筑基化合物有很好的信號(hào)響應(yīng)，進(jìn)一步說(shuō)明了我們所提出的方法的優(yōu)越性。
　　 2、在導(dǎo)電玻璃電極（ITO）表面上設(shè)計(jì)了一種含

4、有艤硫鍵的新型光致電化學(xué)傳感器，基于GSH可以打斷雙硫鍵的特點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)了GSH的定量檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)中我們合成了具有光電性能的配合物[Ru（bpy）2dppz]（BF4）2·2H2O，并將其包裹在表面修飾氨基的SiO2納米顆粒中，形成了粒徑均勻的具有較高光電性能的[Ru（bpy）2dppz]2+-SiO2納米粒子。利用ITO電極表面豐富的羥基容易與巰基硅烷化試劑（3-MPTES）反應(yīng)的特點(diǎn)，在電極表面修飾上巰基，通過(guò)與PDEA的作用，將雙硫鍵引

5、入到ITO電極上，同時(shí)電極表面修飾上氨基。利用戊二醛的交聯(lián)作用，將[Ru（bpy）2dppz]2+-SiO2納米粒子組裝在ITO電極上。根據(jù)GSH與修飾電極作用前后電流的差值，利用光致電化學(xué)分析法檢測(cè)GSH，檢測(cè)限為7.8×10-8mol/L（3σ），線性相關(guān)系數(shù)為0.9976，同時(shí)對(duì)該傳感器的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性進(jìn)行了研究，實(shí)驗(yàn)效果良好。
　　 3、將化學(xué)發(fā)光與光敏電化學(xué)技術(shù)結(jié)合在一個(gè)體系中，利用發(fā)光強(qiáng)度大、激發(fā)波長(zhǎng)穩(wěn)定的CIPO-

6、H2O2-9，10-二苯基蒽化學(xué)發(fā)光體系代替物理激發(fā)光源，首次在普通的電化學(xué)工作站實(shí)現(xiàn)了免光源光致電化學(xué)檢測(cè)。通過(guò)ITO電極表面的硅烷化反應(yīng)，在電極表面修飾上氨基，利用戊二醛的交聯(lián)作用，將氨基修飾的捕獲DNA（S1）連接到電極表面，與不同濃度的目標(biāo)DNA（S2）雜交后，在相同濃度的[Ru（bpy）2dppz]2+溶液中嵌插作用后，通過(guò)對(duì)修飾電極電流的檢測(cè)，間接檢測(cè)目標(biāo)DNA的濃度，檢測(cè)范圍2.0×10-8～4.0×10-7mol/L，檢