苦蕎蛋白酶解物的制備及抗菌活性的研究.pdf

1、蕎麥是一種藥食兩用的植物，具有較高的營養(yǎng)價值和保健功能（具有防癌、降血糖、降血脂、抗衰老等多種生理功能）。其中，蕎麥蛋白作為蕎麥中重要的生物活性物質(zhì)，具有天然的抗菌活性和一定的抗氧化能力，因此具有重要的研究、開發(fā)價值和廣闊的市場前景。
　　本文以山西苦蕎為原料，在苦蕎籽粒去殼、過篩、脫脂等預(yù)處理的基礎(chǔ)上，建立了一套蕎麥蛋白的提取、分離、酶解的工藝方案，并對所制備得到的苦蕎蛋白粗提物和苦蕎蛋白酶解產(chǎn)物進行了體外抑菌活性和抗氧化能力的

2、研究。
　　研究內(nèi)容主要包括以下幾個方面：
　?。?）采用硫酸銨鹽析法提取苦蕎水溶性蛋白，采用DEAE-Fast-Flow離子換層析和Sephadex G-75凝膠過濾層析法初步分離得到苦蕎蛋白粗提物，再將粗提物分別經(jīng)1h胃蛋白酶、2h胰蛋白酶酶解和SephadexG-25凝膠純化，得到了4個主要的苦蕎蛋白酶解產(chǎn)物，依次命名為Pep1、Pep2、Pep3、Pep4。
　?。?）選取大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、鼠傷寒沙門氏

3、菌、阪崎腸桿菌為指示菌，并采用濾紙片擴散法檢測苦蕎蛋白粗提物對以上菌株的抗菌活性。實驗結(jié)論得出：除大腸桿菌外，苦蕎蛋白粗提物對上述幾種菌都具有抑制作用，抑菌活性也隨濃度的增大而增強，其中對革蘭氏陽性菌（G+）的抑菌效果優(yōu)于革蘭氏陰性菌（G－）。
　?。?）選取大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、鼠傷寒沙門氏菌、阪崎腸桿菌為指示菌，采用二倍稀釋法分別測定了苦蕎蛋白酶解產(chǎn)物（Pep1-Pep4）的最小抑制濃度（MIC）。實驗結(jié)果表明：苦蕎蛋白酶

4、解產(chǎn)物對上述4種指示菌均具有抑菌作用，抑菌能力依次為：金黃色葡萄球菌﹥鼠傷寒沙門氏菌﹥阪崎腸桿菌﹥大腸桿菌，其中Pep3和Pep4對金黃色葡萄球菌抑制效果最顯著，MIC分別為：0.375mg/ml和0.093mg/ml。
　?。?）選擇三種常用的體外抗氧化模型（DPPH、ABTS、FRAP），研究了不同濃度下苦蕎蛋白粗提取物的抗氧化效果。結(jié)果顯示：在一定濃度范圍內(nèi)，隨著苦蕎蛋白粗提物濃度的增強，抗氧化能力也不斷提高，略低于對照VC