Leydig細胞中Toll樣受體(TLR)介導的睪丸天然免疫反應.pdf

1、背景與目的:睪丸是免疫豁免組織,然而睪丸仍能有效的清除感染,說明睪丸自身具有抵抗病原體的機制。本論文的主要目的是研究Leydig細胞在睪丸中的天然免疫功能。睪丸巨噬細胞表現(xiàn)出較低的免疫活性,其機理尚不清楚,我們研究了Leydig細胞對巨噬細胞免疫反應的調(diào)節(jié)。
　　 材料與方法:利用C57/BL6小鼠為模型分離純化小鼠Leydig細胞。利用定量實時RT-PCR(Q-PCR)分析基因mRNA的水平。使用Western blottin

2、g和免疫組化染色研究蛋白的表達定位。ELISA檢測細胞因子產(chǎn)生和睪酮合成。利用基因敲除小鼠模型研究TAM受體在TLR介導天然免疫反應中的作用。
　　 結(jié)果:小鼠Leydig細胞中表達較高水平的TLR3和TLR4,以及較低水平的TLR2、TLR7、TLR9和TLR12,但不表達其它TLR。Leydig細胞中的TLR3和TLR4可被其受體激活,會引起核因子κB(NF—κB)和干擾素調(diào)節(jié)因子3(IRF3)的活化,進而誘導該細胞分泌炎癥

3、因子(IL-1β,IL-6和TNF-α)和Ⅰ型干擾素(IFN-α及IFN-β),對入侵病原體產(chǎn)生免疫防御作用。為防止睪丸組織持續(xù)產(chǎn)生慢性炎癥反應,Leydig細胞中TLR3和TLR4受體的激活必須受到嚴格的調(diào)控。研究發(fā)現(xiàn)Leydig細胞中同時表達Axl和Mer受體,它們以協(xié)同的方式抑制TLR3和TLR4信號傳導,調(diào)節(jié)Leydig細胞的天然免疫反應。敲除Axl及Mer雙基因敲除(Axl-/-Mer-/-)小鼠的Leydig細胞中TLR3和

4、TLR4激活水平顯著升高。Gas6是TAM受體的特異性配體,可以顯著抑制Leydig細胞中TLR-介導的NF-κB和IRF-3的激活及炎癥因子的表達,而這種抑制效應在Axl-/-Mer-/-Leydig細胞中則不存在。這些結(jié)果說明Axl和Mer受體酪氨酸激酶在Leydig細胞中以協(xié)同的方式負調(diào)控TLR信號。另外我們發(fā)現(xiàn)TLR3與TLR4的活化可以抑制Leydig細胞合成睪酮的能力。實驗表明Leydig細胞可以抑制巨噬細胞的免疫反應能力,