胃癌組織與癌旁組織中ERCC1、AKT1的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、背景與目的：
　　 許多惡性腫瘤包括胃癌的發(fā)生均與基因的突變有關(guān)，如癌基因的激活或抑癌基因的失活。近年來我國(guó)胃癌發(fā)生率逐漸增加，其死亡率約占癌癥死亡率的1/4，手術(shù)是早期胃癌及原位癌的主要治療手段，然而術(shù)后大部分患者發(fā)生原位復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。近半世紀(jì)來各種臨床研究致力于研究胃癌的化療，如氟尿嘧啶、順鉑、紫杉醇等化療藥物都對(duì)胃癌有一定的療效，但是這些藥物單藥或聯(lián)合化療有效率不到50％。
　　 Aktl(絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶

2、，serine-threonine kinase)，又稱蛋白激酶B(PKB)，在細(xì)胞的增殖、代謝以及腫瘤發(fā)生等生物學(xué)過程中都具有非常重要的作用。哺乳動(dòng)物中Akt有三種亞型：Aktl(PKBa），Akt2(PKBβ）和Akt3(pKBΥ)，三種亞型在人類的多數(shù)組織中都有不同水平的表達(dá)，其作用也不同，Aktl可抑制凋亡和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、促進(jìn)胎盤發(fā)育和細(xì)胞生長(zhǎng)，同時(shí)參與糖代謝過程。Akt2則主要在糖代謝中發(fā)揮重要作用，目前有研究報(bào)道Akt2在結(jié)

3、腸癌的轉(zhuǎn)移中起到重要的作用。但Akt3在體內(nèi)體外研究報(bào)道較少。Akt在多種腫瘤中被激活或高表達(dá)，胰腺癌、甲狀腺癌、結(jié)腸癌等腫瘤中均發(fā)現(xiàn)有Akt的活化或高表達(dá)。
　　 ERCC1(核苷酸切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因，excision repair crosscomplementing1）定位于19q13.2，是核苷酸外切修復(fù)酶家族中的重要成員之一，是細(xì)胞存活必須的DNA修復(fù)基因，具有損傷的識(shí)別和切除功能，其表達(dá)的高低能反映整個(gè)DNA切除修

4、復(fù)(Nuclleotide excision repair，NER)活性的水平，也是鉑類誘導(dǎo)DNA損傷修復(fù)中關(guān)鍵酶，與鉑類耐藥密切相關(guān)。
　　 近年來有研究提出組織中ERCC1的高表達(dá)與鉑類耐藥有關(guān)，與預(yù)后密切相關(guān)，對(duì)治療胃癌化療方案的選擇提供了依據(jù)，AKT1與腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、促進(jìn)細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移，促進(jìn)血管形成密切相關(guān)，同時(shí)有資料顯示AKT1高表達(dá)與化療耐藥有關(guān)。由于個(gè)體之間的差異性，術(shù)后輔助化療僅有少部分患者從中受益，找到

5、特定基因的改變作為敏感性和耐藥性的標(biāo)志，提示預(yù)后，可使治療更加具有針對(duì)性、提高療效、避免不必要的毒副反應(yīng)。本研究應(yīng)用RT-PCR的方法檢測(cè)胃癌組織及癌旁組織中ERCC1及AKT1的表達(dá)規(guī)律，以了解ERCC1、AKT1的臨床意義，為腫瘤的檢測(cè)與治療提供新的途徑。
　　 材料與方法
　　 取2008年3月至2009年3月在我院手術(shù)治療的胃癌患者51例（男32例，女19例），年齡34-71歲（中位年齡57歲）。選取這些患者手術(shù)

6、切除的腫瘤組織、癌旁組織，手術(shù)多采取胃癌根治術(shù)，術(shù)式多采用D2畢I式、畢II式或胃空腸Roux-en-Y吻合術(shù)，不能行根治術(shù)的患者行姑息性手術(shù)，組織置于-196℃液氮中保存。其中I期(T1NoM07例，T1N1M05例，T2NoM09例)21例，Ⅱ期(T1N2M02例，T2N1M03例,T3NoM07例)12例，Ⅲ期(T2N2M03例，T3N1-2M09例,T4loM02例)14例，IV期(T4N3M11例，T2N2M11例，T4N3M

7、11例，T4N2M11例)4例。分期按TNM國(guó)際分期( UICC，1997)制訂標(biāo)準(zhǔn)。用PT-PCR方法檢查胃癌及癌旁組織中ERCC1與Aktl的表達(dá)情況，以B-actin作為內(nèi)參，其平均表達(dá)水平為6.1x103，以ERCC1、Aktl表達(dá)水平>6.1x103為高表達(dá)（陽性），以mRNA表達(dá)水平_<6.1xl03為低表達(dá)（陰性）。I期手術(shù)后部分不化療，II-IV期手術(shù)后作化療，采用DDP+5-FU+EPI或奧沙利鉑+5-FU方案，每21

8、天為一周期，連續(xù)4-6周期。隨訪至2009年10月，觀察ERCC1、Aktl的表達(dá)在有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、不同分期中的差異及與預(yù)后的關(guān)系。
　　 結(jié)果
　　 1.癌旁組織中ERCC1、Aktl的表達(dá)均高于癌組織。
　　 2.有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者ERCC1、Aktl的表達(dá)高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。
　　 3.將I期、II-IV期分組后，I期ERCCI(+)、Aktl(+)表達(dá)者的預(yù)后明顯好于ERCCI(-)、Aktl(-)表

9、達(dá)者，其中ERCC1、Aktl均陽性者預(yù)后好于均陰性者。而II-Ⅳ術(shù)后化療者ERCC1、Aktl均陰性者預(yù)后好于均陽性者。
　　 結(jié)論
　　 1.ERCC1、Aktl在癌旁組織中陽性表達(dá)率明顯高于胃癌組織，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者表達(dá)率高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者P

10、呈正相關(guān)。
　　 2.II-IV期病人ERCC1、Aktl均低表達(dá)者PFS明顯長(zhǎng)于高表達(dá)者，而I期病人ERCC1、Aktl高表達(dá)者PFS長(zhǎng)于低表達(dá)者，可說明ERCC1、Aktl高表達(dá)者對(duì)應(yīng)用鉑類+5-FU敏感性低，可能與對(duì)鉑類、氟尿嘧啶類藥物產(chǎn)生的基因損傷有修復(fù)作用有關(guān)，高表達(dá)患者應(yīng)用鉑類+5-FU不能延長(zhǎng)PFS。
　　 3.ERCC1和Aktl在不同分期的胃癌患者中作用機(jī)制不同，與預(yù)后及耐藥聯(lián)系密切，在分子水平對(duì)其變化