miR-223在腎透明細胞癌中的表達和作用.pdf

1、目的:mi croRNAs(mi RNAs)是一類堿基長度約22個堿基的非編碼小RNA。隨著miRNA的研究進展，越來越多證據(jù)表明，這類不編碼蛋白的小RNA通過轉錄后調控等機制，不同程度地參與了腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。近年來的研究發(fā)現(xiàn)miR-223在感染、炎癥和腫瘤中起著重要的作用。在腫瘤研究中發(fā)現(xiàn)，miR-223和白血病，肝細胞腫瘤，食管癌等腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著密切的關系，但是其在腎透明細胞癌中的表達及作用目前尚未有報道。本研究主要探討miR

2、-223在腎透明細胞癌組織和其瘤旁組織中的表達，并分析病人臨床資料及相關性。同時在腎透明細胞癌細胞系中上調miRNA，研究其對腫瘤的增殖與侵襲能力的影響，分析miR-223在腎透明細胞癌發(fā)生與發(fā)展中的作用，為臨床診斷和治療尋找新的方向。
　　方法:①采用實時定量聚合酶鏈式反應(real-time RT-PCR)法檢測miR-223在腎透明細胞癌組織和瘤旁組織中的表達，并通過SPSS統(tǒng)計軟件分析所選病例臨床數(shù)據(jù)與miR-223表達量

3、的關系。同時檢測腎透明細胞癌細胞系786-0、Caki-1、Sn12-pm6、ACHN以及正常人近段腎小管上皮細胞系HKC中miR-223的表達量。②通過人工脂質體瞬時轉染法，采用miR-223模擬物轉及對照無意義序列分別轉染腎透明細胞癌細胞系786-0。③通過transwell遷移實驗和劃痕實驗檢測轉染miR-223模擬物后的786-0細胞的遷徙能力的變化，采用MTS法檢測其增殖情況的變化，并通過流失細胞儀分析其細胞周期的變化。

4、>　　結果:①miR-223在腎透明細胞癌組織和腎透明細胞癌細胞系中的表達量明顯高于瘤旁組織(P=0.0003)和正常腎小管上皮細胞，分析病例的臨床數(shù)據(jù)顯示miR-223的表達量與腫瘤的大小有關，腫瘤直徑大于4cm的腫瘤miR-223表達量升高(P=0，0028)。②在transwell遷移實驗中，轉染miR-223模擬物的786-0細胞遷移的細胞數(shù)量比轉染無意義序列的對照組遷移數(shù)多(P＜0.0001)，劃痕實驗顯示轉染miR-223模

5、擬物的786-0細胞愈合能力比轉染無意義序列的對照組快，增殖實驗表明轉染miR-223模擬物的786-0細胞增殖速度快于轉染無意義序列的對照組(P=0.006)，細胞周期顯示轉染miR-223模擬物的786-0細胞G1期細胞數(shù)減少，S期細胞增加，提示處于增殖的細胞數(shù)多(p＜0.05)。
　　結論:①miR-223的異常表達可能與腎透明細胞癌發(fā)生發(fā)展有關。②上調miR-223的表達可促進腎透明細胞癌細胞株的增殖和遷移能力。③上調mi