異種凍干骨及其與PRF復(fù)合物對(duì)骨缺損修復(fù)與骨整合作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過(guò)對(duì)兔雙側(cè)下頜無(wú)牙區(qū)牙槽骨行骨極限缺損造模后分別植入富血小板纖維蛋白(Platelet-rich fibrin，PRF)異種凍干骨復(fù)合物及異種凍干骨，并同期植入鈦螺紋釘，觀察并檢測(cè)缺損區(qū)新骨形成及釘周骨整合情況，探討PRF和異種凍干骨在骨修復(fù)及骨整合中的作用機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)參考。
　　方法:
　　1.分組:健康成年新西蘭大白兔12只，雌雄不限，隨機(jī)分為3組，每組4只，分別于術(shù)后4、8、12周處死。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

2、采取自身對(duì)照方法，右側(cè)下頜骨極限缺損區(qū)為實(shí)驗(yàn)組，植入PRF/異種凍干骨復(fù)合物;左側(cè)下頜骨極限缺損區(qū)為對(duì)照組，植入異種凍干骨。
　　2.異種凍干骨獲取及制備:取自人骨組織，經(jīng)骨髓清洗、深凍、凍干和射線輻照等過(guò)程制備。
　　3.PRF的制備:于兔耳中央動(dòng)脈處快速抽取5ml血置于未添加抗凝劑的采血管中，迅速置于已配平的離心機(jī)中，以3000r/min的速度離心10min，停止后取出離心管靜置，可見(jiàn)管內(nèi)血液分為3層:最上層為貧血小板血

3、漿層，中間層為纖維蛋白凝膠層，最底層為紅細(xì)胞碎片層。棄上清液，分離中間的纖維蛋白凝膠，即為PRF。5ml兔動(dòng)脈血可制備約7.5×4.0×0.4mm的PRF。
　　4.造模及干預(yù):在每只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的雙側(cè)下頜骨門(mén)齒遠(yuǎn)中無(wú)牙區(qū)牙槽骨各造一約5×4×3mm的缺損，缺損后緣位于頦孔前約4mm處，其下緣與頦孔平齊。分別自缺損區(qū)近、遠(yuǎn)中壁遠(yuǎn)離缺損區(qū)方向以鈦螺紋釘配套鉆針制備一約直徑1.5mm，深3.5mm的種植窩，將鈦螺紋釘擰入種植窩，右側(cè)為實(shí)驗(yàn)

4、組，缺損區(qū)充填PRF/異種凍干骨復(fù)合物;左側(cè)為對(duì)照組，缺損區(qū)僅植入異種凍干骨，逐層縫合，術(shù)后正常飲食。
　　5.觀察結(jié)果:分別于術(shù)后4、8、12周以空氣栓塞法處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，沿兔口角做切口，分離出下頜骨，去凈其上附麗組織，大體肉眼觀察骨極限缺損區(qū)愈合修復(fù)情況;扭矩實(shí)驗(yàn)測(cè)試鈦螺紋釘-骨界面的結(jié)合強(qiáng)度，收集數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析;組織學(xué)觀察，各標(biāo)本切片行HE染色后，采集圖像，通過(guò)多功能真彩色細(xì)胞圖像分析管理系統(tǒng)分析計(jì)算新骨形成面積占視野區(qū)面

5、積的百分比，進(jìn)行新生骨定量分析。
　　結(jié)果:
　　1.標(biāo)本大體肉眼觀察結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組中所植入的鈦螺紋釘均無(wú)松動(dòng)脫落，所造骨組織缺損區(qū)均逐漸被骨組織覆蓋，表面有不同程度凹陷，實(shí)驗(yàn)組顯示表面形態(tài)恢復(fù)更為理想。
　　2.術(shù)后4、8、12周同一時(shí)間點(diǎn)扭矩測(cè)試實(shí)驗(yàn)組種植體-骨結(jié)合強(qiáng)度高于對(duì)照組，結(jié)果有顯著性差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　3.組織學(xué)觀察術(shù)后4、8、12周同一時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組新生骨面積與對(duì)照組比較