基于光酶誘導(dǎo)的桑葉次生代謝產(chǎn)物及其差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、光酶誘導(dǎo)能影響生物合成途徑，從而使次生代謝產(chǎn)物發(fā)生變化，特別是能顯著提高植物體內(nèi)抗毒素(黃酮、木脂素等)的含量，并能生物合成新的高生物活性化合物。應(yīng)用紫外輻射研究農(nóng)作物抗毒素開展較多，但將光酶誘導(dǎo)應(yīng)用于提高中藥活性成分研究未見報道。通過本課題的研究，為合理利用藥材資源、提高藥材質(zhì)量提供新的技術(shù)手段，并從蛋白質(zhì)水平揭示光酶誘導(dǎo)對活性成分生物合成影響的分子機制。
　　 本論文運用HPLC-DAD及2D-Electrophoresis

2、等技術(shù)，主要對光酶誘導(dǎo)桑葉的合適條件進行了篩選，分離并鑒定了桑葉誘導(dǎo)后的次生代謝產(chǎn)物，并對光酶誘導(dǎo)前后桑葉的差異蛋白質(zhì)組進行了研究。具體內(nèi)容包括：
　　 1、運用HPLC-DAD方法檢測光酶誘導(dǎo)后的桑葉提取物，共檢測到5個顯著變化的特征色譜峰。通過單因素考察，以5個色譜峰的峰面積為指標，篩選得到了光酶誘導(dǎo)桑葉的最佳條件為：8月的新鮮采摘桑葉，UV-B照射60分鐘；
　　 2、用篩選得到的光酶誘導(dǎo)條件對大量桑葉進行誘導(dǎo)；并

3、對5個特征色譜峰進行靶向追蹤分離，最終共分離得到其中3個化合物，并對其中的兩個進行了結(jié)構(gòu)鑒定，其化學(xué)結(jié)構(gòu)為Chalcomoracin和Moracin N；且Chalcomoracin為Diels-Alder加合物；
　　 3、運用2D-Electrophoresis方法對光酶誘導(dǎo)前后桑葉的差異蛋白質(zhì)組進行研究，通過Progenesis SameSpots軟件處理，得到61個差異點，通過MALDI-TOF-MS分析鑒定了其中的26