殼聚糖基纖維對(duì)肝組織創(chuàng)面止血作用的研究.pdf

1、目的：肝臟至少承擔(dān)著5000種以上的生理功能，是人體最重要的器官之一。由于肝臟是多血管的實(shí)質(zhì)性臟器，外傷時(shí)常伴有大量的出血，常用的經(jīng)典止血方法有直接壓迫、結(jié)扎和電灼止血等，但死亡率仍達(dá)2％-8％，其中出血為最常見的原因。目前臨床肝臟外科手術(shù)常用的止血材料包括可吸收明膠海綿、氧化纖維素、膠原蛋白海綿和纖維蛋白膠，但由于有些產(chǎn)品或與創(chuàng)面粘附性差，或其準(zhǔn)備耗時(shí)，在肝臟外傷手術(shù)中使用受限。殼聚糖(Chitosan)是甲殼素脫乙?；漠a(chǎn)物，天然無

2、毒、無抗原性、生物相容性好、可生物降解且具有一定的生物活性，殼聚糖經(jīng)衍生化后具有良好水溶性、成膜性，抗炎、螯合重金屬等作用，在醫(yī)用材料領(lǐng)域應(yīng)用前景廣闊。本實(shí)驗(yàn)研究旨在討論殼聚糖基纖維的止血和促進(jìn)創(chuàng)面愈合的效果，并對(duì)其作用機(jī)理進(jìn)行初步探討，為其作為創(chuàng)傷止血愈創(chuàng)材料提供一定的理論依據(jù)。 方法：1、實(shí)驗(yàn)所用殼聚糖基纖維性質(zhì)評(píng)價(jià)，運(yùn)用電位滴定、紅外光譜等方法對(duì)纖維的理化性質(zhì)進(jìn)行評(píng)價(jià)，通過溶血實(shí)驗(yàn)、全身急性毒性實(shí)驗(yàn)、皮內(nèi)刺激實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞毒性

3、實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)了纖維的生物相容性；2、以新西蘭白兔為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，切除兔肝臟左葉部分組織，形成肝臟敞開型創(chuàng)面出血模型。設(shè)立實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組和空白組，實(shí)驗(yàn)組使用殼聚糖基纖維敷于創(chuàng)面處，空白組使用普通紗布，對(duì)照組使用速即紗。通過測定每組的止血成功率和出血量，評(píng)價(jià)纖維的止血效果；通過血液凝血酶原時(shí)間(PT)、部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶時(shí)間(TT)和纖維蛋白原(FIB)的測定、血液流變學(xué)、紅細(xì)胞聚集和血小板粘附等實(shí)驗(yàn)研究了纖維對(duì)血液不同組分的作用

4、，初步探討了纖維的止血機(jī)理；3、以大白鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，在鼠肝臟左葉上制造5mm×3mm×2mm的創(chuàng)面，實(shí)驗(yàn)組將殼聚糖基纖維敷于創(chuàng)面上，對(duì)照組敷以速即紗，定期進(jìn)行肉眼觀察和行組織學(xué)檢查，評(píng)價(jià)創(chuàng)面的粘連、炎癥浸潤和組織增生情況，以此反映纖維促進(jìn)創(chuàng)面愈合的作用。以體外培養(yǎng)大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞BRL為研究對(duì)象，對(duì)纖維促肝細(xì)胞生長的作用進(jìn)行評(píng)價(jià)。 結(jié)果：1、實(shí)驗(yàn)所用殼聚糖基纖維符合醫(yī)用材料要求，無菌無熱原；溶血實(shí)驗(yàn)表明殼聚糖基纖維無溶血作用，相容

5、性實(shí)驗(yàn)表明纖維無急性毒性和皮內(nèi)刺激性，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明殼聚糖基纖維對(duì)L929成纖維細(xì)胞沒有毒性作用，并且對(duì)L929細(xì)胞增殖有一定的促進(jìn)作用，其中以100μg/mL濃度時(shí)對(duì)L929細(xì)胞的促增殖作用最為顯著；2、以新西蘭白兔肝臟左葉部分切除為出血模型的實(shí)驗(yàn)中，結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)組的止血成功率為100％，出血量為0.443±0.030g，在止血率和出血量指標(biāo)上均優(yōu)于對(duì)照組和空白組(P<0.05)；PT、FIB、APTT和TT的測定結(jié)果表明不同濃

6、度的殼聚糖基纖維溶液對(duì)PT和APTT沒有明顯的作用，能使FIB濃度明顯升高，且隨著溶液濃度的增加FIB濃度逐漸增加，TT隨溶液濃度的增加而縮短；血液流變學(xué)測定結(jié)果顯示殼聚糖基纖維溶液在高、中、低切變率下均能使全血粘度升高；殼聚糖基纖維能顯著促進(jìn)紅細(xì)胞的沉降，且隨著溶液濃度的增加沉降量增加，同時(shí)能促進(jìn)紅細(xì)胞發(fā)生疊連；殼聚糖基纖維能夠吸附血小板，促進(jìn)血小板的聚集；3、在促進(jìn)創(chuàng)面愈合的動(dòng)物活體實(shí)驗(yàn)中，組織學(xué)切片觀察結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)組材料體內(nèi)降解時(shí)