真菌發(fā)酵麻瘋樹廢棄餅粕產(chǎn)蛋白酶的研究.pdf

1、隨著世界石油資源的枯竭,種植麻瘋樹以提煉生物柴油已經(jīng)成為解決資源短缺的有效途徑之一。麻瘋樹的廣泛種植和生物柴油的批量生產(chǎn)將會產(chǎn)生大量的餅粕,雖然其含有較高的營養(yǎng)價值,但由于其含有佛波醇和核糖體失活蛋白等毒性成分而沒有得到很好利用。如果將餅粕直接排放,不僅會造成資源的浪費,而且會污染周圍的環(huán)境。因此,如何利用麻瘋樹餅粕是一個迫切需要解決的問題。與麻瘋樹餅粕相似的菜籽餅、棉籽餅、蓖麻籽餅粕,已有研究人員對其微生物脫毒利用展開了研究。脫毒后的

2、餅粕可以作為畜禽的飼料,得到更好地利用。
　　本文以黑曲霉和黃曲霉作為發(fā)酵菌株,以提油后的麻瘋樹廢棄餅粕作為培養(yǎng)基,采用固態(tài)發(fā)酵方式生產(chǎn)蛋白酶。
　　對黑曲霉及黃曲霉菌株產(chǎn)蛋白酶的工藝條件進行研究,黑曲霉發(fā)酵培養(yǎng)條件為水料比50％,添加5％葡萄糖,發(fā)酵4天,產(chǎn)酶最好。黃曲霉發(fā)酵培養(yǎng)條件為水料比50％,添加10％乳糖,發(fā)酵5天,產(chǎn)酶最佳。同時對液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)蛋白酶條件進行了初步探索。對黑曲霉及黃曲霉菌株產(chǎn)蛋白酶進行初步純化,通過4

3、0％的硫酸銨沉淀雜蛋白再用70％硫酸銨沉淀蛋白酶,然后用透析袋進一步純化濃縮蛋白酶。然后對蛋白酶的酶學性質(zhì)作了研究。黑曲霉所產(chǎn)蛋白酶最適催化溫度為50℃,最適pH值為4.0,最大反應速度Vmax=18.05μg/min,米氏常數(shù)Km=2.23 mg/ml。有機溶劑對其酶活的激活作用則較為明顯,15％的甲醇或10％乙醇分別可以提升酶活31％和24％。各種金屬離子中Ca2+的促進作用最為明顯可以提升酶活28％,而Na+和Hg2+則能夠抑制高