寧夏地區(qū)大腸桿菌臨床分離株的耐藥性研究.pdf

1、為了研究寧夏地區(qū)大腸桿菌臨床分離株的耐藥性，本研究對(duì)182株大腸桿菌臨床分離株采用PCR方法進(jìn)行了耐藥基因的的分子檢測(cè)，采用紙片擴(kuò)散法進(jìn)行了耐藥表型的分析，并分析了182株菌株的致病性以及致病性與耐藥性的關(guān)系、血清型與耐藥性的相關(guān)性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 ⑴根據(jù)Genbank報(bào)道的參考序列設(shè)計(jì)磺胺類藥物耐藥基因:sul1、 sul2、sul3;四環(huán)素類藥物耐藥基因:tetA、tetB、tetC、tetD、tetE、tetG;氨基

2、糖苷類藥物耐藥基因:aadB、aadD、aadA1、aadA2、aacC2、aacC4、aac(3)-Ⅰa、aac(3)-Ⅱa、aph(3)-Ⅱa;氯霉素類藥物耐藥基因:Cat1、CmlA、Flor;β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥基因:CTX-M、，SHV、OXA、TEM，共25種耐藥基因的PCR特異性引物，建立了耐藥基因的PCR檢測(cè)方法，結(jié)果表明，耐藥基因的陽(yáng)性株分別擴(kuò)增出了預(yù)期大小的片段，而陰性菌株和空白對(duì)照沒有擴(kuò)增出預(yù)期大小的片段，且目的條

3、帶清晰、特異，說明本實(shí)驗(yàn)所建立的PCR檢測(cè)方法特異、靈敏，可作為大腸桿菌臨床分離株耐藥基因的檢測(cè)方法。
　　 ⑵采用已建立的PCR方法，對(duì)以上25種耐藥基因進(jìn)行了分子檢測(cè)。結(jié)果表明，共檢測(cè)到了17種耐藥基因，分別為sul1(62.6％)、sul2(46.7％)、sul3(1.6％)、tetA(40.1％)、tetB(33.5％)、aadA1(8.2％)、aadA2(8.2％)、aacC2(47.8％)、aacC4(17.0％)、

4、aac(3)-Ⅱa(45.1％)、aph(3)-Ⅱa(6.6％)、Cat1(16.5％)、CmlA(7.1％)、Flor(4.9％)、CTX-M(20.3％)、OXA(12.6％)、TEM(54.4％)。未檢測(cè)到tetC、tetD、tetE、tetG、aadB、aadD、aac(3)-Ⅰa、SHV8種耐藥基因。
　　 ⑶采用CLSI推薦的K-B紙片擴(kuò)散法對(duì)182株大腸桿菌臨床分離株進(jìn)行了五類12種抗菌藥物的藥敏試驗(yàn)。結(jié)果表明，1

5、82株菌株對(duì)12種抗菌藥物表現(xiàn)出不同程度的耐藥，耐藥率分別為氨芐西林(86.3％)、阿莫西林(85.7％)、四環(huán)素(74.7％)、復(fù)方新諾明(63.7％)、慶大霉素(52.7％)、頭孢噻肟(38.5％)、妥布霉素(29.1％)、卡那霉素(25.3％)、強(qiáng)力霉素(19.2％)、氯霉素(18.7％)、阿米卡星(8.8％)、頭孢他啶(8.2％)。182株大腸桿菌臨床分離株共有86種耐藥譜，且以多重耐藥為主，最少的為1耐，最多的可達(dá)12耐，5耐

6、菌株數(shù)量最多。
　　 ⑷通過致病性試驗(yàn)分析，182株大腸桿菌臨床分離株中有145株致病性大腸桿菌。在145株致病性菌株中，135株菌株檢測(cè)出有耐藥性，致病性大腸桿菌的耐藥率為93.1％。在12種抗菌藥物中，致病性大腸桿菌對(duì)氨芐西林的耐藥率最高為87.6％。
　　 ⑸在本實(shí)驗(yàn)室前期對(duì)182株大腸桿菌進(jìn)行血清型鑒定的基礎(chǔ)上，本研究對(duì)寧夏地區(qū)大腸桿菌血清型和耐藥性進(jìn)行了相關(guān)性分析，結(jié)果表明在O1和O5型菌株中，69％以上菌株耐