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文檔簡介
1、體外制備一種可移植的人工肝臟的肝組織工程,為惡性肝病的治療帶來了希望。肝組織工程的主要問題一是用于肝組織工程的支架要能誘導(dǎo)體內(nèi)的血管新生,為新生的肝組織提供足夠的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì),一是要能為肝細胞提供一個良好的生長環(huán)境,保證新生肝組織具有正常的肝功能。因此,本文從提高支架誘導(dǎo)血管新生能力和提高支架的肝細胞親和性兩方面出發(fā),制備了一種含有對細胞有特異性結(jié)合性的甘草次酸(GA)的肝組織工程支架材料。
首先通過共價修飾制備了甘草次
2、酸修飾的殼聚糖硫酸酯(SCTS-GA)、可酶交聯(lián)的對羥基苯丙酸修飾的殼聚糖硫酸酯(SCTS-HPA),制備了殼聚糖(CTS)、羧甲基殼聚糖(CMCTS)、殼聚糖硫酸酯(SCTS)、SCTS-GA修飾的玻璃片材料,并在辣根過氧化物酶/過氧化氫(HRP/H2O2)存在制備了凝膠性能簡單可調(diào)的酶交聯(lián)水凝膠。
為了考察SCTS-GA材料的誘導(dǎo)血管新生能力,我們體外研究了人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)在CTS、CMCTS、SCTS、
3、SCTS-GA上的粘附和增殖行為,發(fā)現(xiàn)SCTS有更好的細胞親和性,并且GA的引入對增強了HUVEC粘附和增殖能力。體內(nèi)研究了CTS、CMCTS、SCTS、SCTS-GA支架誘導(dǎo)血管新生的能力,結(jié)果顯示SCTS能很好的誘導(dǎo)組織長入和血管新生,并且GA的引入對SCTS支架的誘導(dǎo)血管新生能力有一定的加強作用。與此同時,發(fā)現(xiàn)CTS、CMCTS支架在實驗過程中因支架凝血造成了支架植入部位的皮膚壞死,經(jīng)過分析我們發(fā)現(xiàn)具有抗凝血特性的SCTS可通過抑
4、制血小板粘附表達抗凝血特性,從而保證了血管支架材料的安全性。
為了考察SCTS-GA作為肝組織工程支架材料的可行性,我們首先以易得的HepG2細胞考察了SCTS-GA對HepG2細胞的粘附和增殖行為的影響,結(jié)果顯示含有GA的材料表現(xiàn)出了良好的細胞親和特性。然后,我們制備了含有GA的多孔支架材料SCTS-GA,考察了支架中GA對原代鼠肝細胞功能的維持和球體形成的影響,結(jié)果顯示,含有GA的支架材明顯的促進了細胞的白蛋白、尿素的
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