雞矢藤環(huán)烯醚萜苷對(duì)尿酸性腎病大鼠的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、尿酸性腎病(Uric acid Nephropathy,UAN)又稱(chēng)痛風(fēng)性腎病，是由于血尿酸濃度過(guò)高，尿酸鹽在腎臟沉積、結(jié)晶導(dǎo)致的腎臟損傷。本課題采用的雞矢藤環(huán)烯醚萜苷(Iridiod Glycosides from Paederia Scandens，IGPS)是從雞矢藤中提取的一類(lèi)有效成分，其主要活性成份為雞矢藤苷、雞矢藤次苷、車(chē)葉草苷。我們的前期研究結(jié)果顯示，雞矢藤提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)性高尿酸血癥及痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎均有明確的保護(hù)作用。本課題進(jìn)

2、一步研究了IGPS對(duì)尿酸性腎病大鼠的影響及其可能的作用機(jī)制。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 1 IGPS對(duì)尿酸性腎病大鼠的保護(hù)作用采用灌胃給予促尿酸生成劑腺嘌呤（100 mg/kg，ig，qd×28d）和腹腔注射尿酸氧化酶抑制劑氧嗪酸鉀(250 mg/kg，ip，qw)聯(lián)合應(yīng)用的方法制備大鼠尿酸性腎病模型。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中每天觀(guān)察各組大鼠的毛色、神態(tài)、攝食量、進(jìn)水量、尿量和行為活動(dòng)度等一般情況；造模0d、7d、14d和28d監(jiān)測(cè)大鼠的體重變

3、化情況；造模第5d起每天上午灌胃造模的同時(shí)，下午IGPS各劑量組(280、140、70 mg/kg)、別嘌呤醇（50mg/kg）及苯溴馬?。?0mg/kg）灌胃給藥，每天一次，直至造模結(jié)束。造模28d后檢測(cè)各組大鼠血尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)；計(jì)算腎指數(shù)；取腎臟，常規(guī)HE染色，采用光學(xué)顯微鏡觀(guān)察腎臟的病理變化。
　　 結(jié)果顯示，IGPS(280、140、70 mg/kg，ig，qd×24d)可明顯改善尿酸性腎

4、病大鼠的一般癥狀，可不同程度的增加尿酸性腎病大鼠的體重，降低血尿酸含量，改善腎功能，降低腎指數(shù)。腎臟光鏡的病理結(jié)果顯示，IGPS (280、140、70 mg/kg，ig，qd×24d)可減少腎組織內(nèi)尿酸鹽沉積，減輕腎臟組織的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及纖維化程度。提示IGPS對(duì)腺嘌呤和氧嗪酸鉀所致尿酸性腎病大鼠有較好的保護(hù)作用。
　　 2 IGPS對(duì)尿酸性腎病大鼠的保護(hù)作用機(jī)制2.1 IGPS對(duì)尿酸性腎病大鼠黃嘌呤氧化酶活性的影響采用酶比色

5、法測(cè)定上述尿酸性腎病大鼠的血清及肝臟組織黃嘌呤氧化酶(XO)的活性。結(jié)果顯示，IGPS (280、140、70 mg/kg，ig，qd×24d)可顯著抑制尿酸性腎病大鼠的血清及肝臟XO的活性。提示IGPS降尿酸作用可能與抑制尿酸性腎病大鼠血清及肝臟XO的活性有關(guān)。
　　 2.2 IGPS對(duì)尿酸性腎病大鼠尿酸代謝的影響采用磷鎢酸法測(cè)定各組大鼠尿液尿酸、尿肌酐；測(cè)定各組大鼠尿液容積，并計(jì)算各組大鼠尿酸分級(jí)排泄率。結(jié)果顯示，IGPS(

6、280 mg/kg，ig，qd×24d)可顯著提高尿酸性腎病大鼠的尿液尿酸水平，IGPS(280、140 mg/kg，ig，qd×24d)可促進(jìn)尿酸性腎病大鼠的尿酸分級(jí)排泄。IGPS(280、140、70 mg/kg，ig，qd×24d)對(duì)尿酸性腎病大鼠的尿肌酐及尿液容積無(wú)明顯影響。提示IGPS降血尿酸的作用可能與促進(jìn)尿酸性腎病大鼠的尿酸分級(jí)排泄有關(guān)。
　　 2.3 IGPS對(duì)尿酸性腎病大鼠腎臟組織炎癥因子的影響采用免疫組化法檢

7、測(cè)上述尿酸性腎病大鼠腎臟組織核因子-κB(NF-κBp65)及單核細(xì)胞趨化因子-1(MCP-1)蛋白的表達(dá)；采用逆轉(zhuǎn)錄－聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)MCP-1 mRNA的表達(dá)。結(jié)果顯示，IGPS(280、140、70 mg/kg，ig，qd×24d)可顯著降低尿酸性腎病大鼠腎臟組織NF-κBp65及MCP-1蛋白的表達(dá)，抑制NF-κB向核內(nèi)轉(zhuǎn)移，下調(diào)MCP-1 mRNA的表達(dá)。表明IGPS可有效保護(hù)炎癥因子介導(dǎo)的腎小管間質(zhì)的損傷，

8、這可能是它發(fā)揮對(duì)腎臟保護(hù)作用的重要機(jī)制。
　　 2.4 IGPS對(duì)尿酸性腎病大鼠腎臟組織纖維化的影響采用免疫組化法檢測(cè)上述尿酸性腎病大鼠腎皮質(zhì)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）的表達(dá)；采用逆轉(zhuǎn)錄－聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)α-SMAmRNA的表達(dá)。結(jié)果顯示，GPS(280、140、70 mg/kg，ig，qd×24d)可抑制尿酸性腎病大鼠腎小管間質(zhì)α-SMA蛋白的表達(dá)，下調(diào)α-SMAmRNA的表達(dá)。提示IGPS對(duì)尿酸性腎病大鼠腎臟纖維化