免疫介導(dǎo)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元損傷模型的建立及其發(fā)病機(jī)理.pdf

1、肌萎縮側(cè)索硬化(amyotrophiclateralsclerosis，ALS)是一種以選擇性運(yùn)動(dòng)皮質(zhì)、腦干及脊髓運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元丟失為特征的致死性神經(jīng)變性疾病。臨床上表現(xiàn)為慢性進(jìn)行性肌無(wú)力、肌萎縮及錐體束征等，多于患病后3～5年死于呼吸衰竭。分為家族性ALS(familialALS，fALS)和散發(fā)性ALS(sporadicALS，sALS)，其臨床和病理相似。其中fALS僅占5％～10％，而大約20％的fALS與編碼Cu/Zn超氧化物歧化

2、酶(Cu/ZnSOD1)的基因突變有關(guān)。sALS的發(fā)病機(jī)理不清，選擇性運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元丟失的假說(shuō)主要包括：①自身免疫機(jī)制；②氧化損傷；③細(xì)胞外谷氨酸失衡導(dǎo)致的興奮毒性；④神經(jīng)中絲的過(guò)度磷酸化；⑤線粒體功能異常等。 目前，大量研究表明自身免疫機(jī)制可能參與ALS運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元損傷過(guò)程。ALS患者尸檢的脊髓中發(fā)現(xiàn)T淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)；血清中存在抗鈣通道的抗體；ALSIgG被動(dòng)傳輸給小鼠，可引起后肢癱瘓及IgG在運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元及運(yùn)動(dòng)軸索終末沉積等均支持免疫

3、機(jī)制可能參與sALS的病理生理過(guò)程。因此，建立穩(wěn)定的免疫介導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元損傷動(dòng)物模型，對(duì)于ALS發(fā)病機(jī)制及運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元保護(hù)研究是非常有幫助的。 我們用牛脊髓前角勻漿免疫豚鼠制成免疫介導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元損傷動(dòng)物模型。該模型緩慢起病，進(jìn)行性發(fā)展，且具有選擇性運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元丟失、肌無(wú)力和肌肉萎縮、肌電圖失神經(jīng)改變等特點(diǎn)，與人類ALS相似。在此基礎(chǔ)上，研究谷氨酸興奮毒作用、氧化應(yīng)激、鈣超載等幾方面在免疫作為始動(dòng)因素條件下，引起選擇性運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元損傷

4、過(guò)程中的可能作用，從而為進(jìn)一步開發(fā)保護(hù)性治療藥物奠定理論基礎(chǔ)。 實(shí)驗(yàn)研究論文由四部分組成：第一部分建立免疫介導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元損傷動(dòng)物模型，并對(duì)其臨床表現(xiàn)、運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元變性丟失情況、肌電圖、肌肉神經(jīng)病理、血清抗體及組織內(nèi)原位IgG沉積進(jìn)行研究；第二部分研究免疫介導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元損傷過(guò)程中星形膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)數(shù)量、特異性細(xì)胞骨架蛋白GFAP及星形膠質(zhì)細(xì)胞上谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體(GLT-1)的表達(dá)變化，分析谷氨酸介導(dǎo)的興奮毒機(jī)制在此模型中的可能作用；第