鐵線蓮屬植物的化學(xué)成分研究.pdf

1、毛茛科(Ranunculaceae)鐵線蓮屬(Clematis)植物為多年生木質(zhì)藤本，少數(shù)為草本、灌木或亞灌木。全球有350多種，我國(guó)有約150種，分布于全國(guó)各地，以西南地區(qū)為主。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，人們至今僅對(duì)20余種本屬植物開(kāi)展過(guò)化學(xué)成分的研究，有必要進(jìn)一步拓展研究范圍。 本屬植物部分可作藥用，具有祛風(fēng)除濕、舒筋活血、消腫止痛等功效。《中國(guó)藥典》2005版收載的有5種：威靈仙C.chinensis、棉團(tuán)鐵線蓮C.hexapetal

2、a、東北鐵線蓮C.manshurica(即辣蓼鐵線蓮C.ternifloravar.mandshurica)、小木通C.armandii和繡球藤C.montana，其中前三種是中藥“威靈仙”的植物來(lái)源，后兩種是中藥“川木通”的植物來(lái)源。此外，我國(guó)民間作藥用的尚有40余種，通常以根莖和莖藤入藥，存在比較嚴(yán)重的混用現(xiàn)象。因此，有必要建立準(zhǔn)確可靠的儀器分析方法以鑒別此類藥材的來(lái)源。 本文對(duì)兩種鐵線蓮屬植物的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，并綜合運(yùn)

3、用HPLC-ELSD、HPLC-MS和HPLC/ESI-MSn等分析手段對(duì)不同地區(qū)采集的多種鐵線蓮屬植物的皂苷類成分進(jìn)行了檢測(cè)，進(jìn)而從化學(xué)分類學(xué)角度探討了本屬植物的親緣關(guān)系，可望為鐵線蓮屬藥用植物資源的開(kāi)發(fā)利用提供研究基礎(chǔ)。其主要研究?jī)?nèi)容及成果如下： 1.采用多種柱層析技術(shù)從圓錐鐵線蓮全草的乙醇提取物中分離得到7個(gè)化合物。運(yùn)用ESI-MS、1HNMR、13CNMR等波譜學(xué)手段和理化性質(zhì)鑒定了它們的結(jié)構(gòu)，其中4個(gè)為首次從鐵線蓮屬植

4、物中分離得到(正二十三醇、正二十七烷酸、3,5,7,3’-四羥基黃酮、5，7，3’，5’-四羥基二氫黃酮)。 2.采用多種柱層析技術(shù)對(duì)揚(yáng)子鐵線蓮全草的70％乙醇提取物進(jìn)行了分離分析。運(yùn)用IR、ESI-MS、TOF-MS、1HNMR、13CNMR、HMQC、1H-1HCOSY、HMBC等波譜學(xué)手段和理化性質(zhì)鑒定了其中9個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)。這些化合物均為首次從該植物中分離得到，其中皂苷8個(gè)，1個(gè)為新發(fā)現(xiàn)的三萜皂苷，鑒定為3β，23α-二

5、羥基-12-齊墩果酸-3-O-β-D-吡哺核糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃木糖基-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯，并命名為揚(yáng)子鐵線蓮皂苷A。 3.研究建立了三萜皂苷類成分的HPLC-ELSD定量分析方法，對(duì)鐵線蓮屬16個(gè)樣品(含9種5變種)的70％乙醇提取物中5種三萜皂苷的含量進(jìn)行了測(cè)定。 方法學(xué)考察結(jié)果表明，此法簡(jiǎn)便、

6、精密度高、重復(fù)性好。加樣回收率為91.3～99.5％，各對(duì)照品的檢測(cè)限和定量限分別為0.0507～0.152μg和0.169～0.506μg。但是很多樣品中的皂苷含量低于檢測(cè)限，靈敏度還不夠高。因此，該法僅適用于鐵線蓮屬藥材中含量高的三萜皂苷類成分的含量測(cè)定及其植物來(lái)源的鑒別。 4.研究建立了三萜皂苷類成分的HPLC-MS定量分析方法，對(duì)鐵線蓮屬20個(gè)樣品(含10種4變種)的70％乙醇提取物中4種三萜皂苷的含量進(jìn)行了測(cè)定。

7、 分析方法學(xué)考察結(jié)果表明，此法快速、靈敏、準(zhǔn)確、重復(fù)性好。各對(duì)照品的加樣回收率為95.1～103.1％，檢測(cè)限和定量限分別為0.0220～0.207ng和0.0733～0.656ng，本法靈敏度比本文建立的HPLC-ELSD法高數(shù)百倍。適用于鐵線蓮屬藥材中三萜皂苷類成分的含量測(cè)定及其植物來(lái)源的鑒別。 5.研究建立了三萜皂苷類成分的HPLC/ESI-MSn定性分析方法，對(duì)鐵線蓮屬2種植物中的三萜皂苷類成分進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。

8、先對(duì)從揚(yáng)子鐵線蓮中分得的8個(gè)皂苷對(duì)照品進(jìn)行直接進(jìn)樣分析，根據(jù)多級(jí)質(zhì)譜碎片離子推導(dǎo)其裂解規(guī)律。 然后以這些規(guī)律為基礎(chǔ)，對(duì)揚(yáng)子鐵線蓮根莖和商品威靈仙的70％乙醇提取物進(jìn)行多級(jí)質(zhì)譜和物質(zhì)基礎(chǔ)研究，共推定了33個(gè)三萜皂苷類成分。 6.采用所創(chuàng)建的HPLC-MSn法考察三萜皂苷在鐵線蓮屬植物中的分布，并根據(jù)其中17個(gè)推定結(jié)構(gòu)的三萜皂苷探討本屬植物間的親緣關(guān)系。 研究表明，化學(xué)分類與經(jīng)典的形態(tài)分類結(jié)果不完全一致，其中某些種甚