TGF-β1誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞向腫瘤干細(xì)胞轉(zhuǎn)化的EMT機(jī)制研究——以及化療對(duì)干細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)的影響.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。研究蚴雄導(dǎo)師虢季磅級(jí)學(xué)院河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指

2、導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名：璐攤章：季孢列廬至月泌日中文摘要TGF131誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞向腫瘤干細(xì)胞轉(zhuǎn)化的EMT機(jī)制研究以及化療對(duì)干細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)的影響中文摘要第一部分：TGFpl誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞向腫瘤干細(xì)胞轉(zhuǎn)化的EMT機(jī)制研究目的：通過TGF131誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞發(fā)生的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epit

3、helialmesenchymaltransition，EMT)，研究EMT能否使腫瘤干細(xì)胞相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)發(fā)生變化，并討論其意義。方法：將人乳腺癌細(xì)胞株MCF7置于37℃，飽和濕度5％C02，含10％胎牛血清I沖Ⅶ1640培養(yǎng)基中進(jìn)行常規(guī)培養(yǎng)，待細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)生長期后用于實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)分兩組，實(shí)驗(yàn)組MCF7細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)加入TGFp1，使其濃度達(dá)到lOng／ml，對(duì)照組加入等量PBS液。1TGFDl誘導(dǎo)培養(yǎng)MCF7細(xì)胞發(fā)生EMT的形態(tài)學(xué)觀察：將

4、TGFp1作用于MCF7細(xì)胞株，在倒置相差顯微鏡下定時(shí)觀察細(xì)胞的形態(tài)變化。2細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)(MTT法)檢測TGFp1對(duì)細(xì)胞增殖的影響。3應(yīng)用24孔Transwell侵襲小室進(jìn)行MCF7細(xì)胞的侵襲試驗(yàn)，檢測TGFB1對(duì)MCF7細(xì)胞株侵襲能力的影響。應(yīng)用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測TGFDl對(duì)MCF7細(xì)胞株遷移能力的影響。4RTPCR檢測TGFp1處理72h后細(xì)胞中干細(xì)胞相關(guān)標(biāo)記物Oct4基因和EMT相關(guān)標(biāo)記物Ecadherin基因、Ncadherin基