大豆甙元對(duì)高膽固醇血癥人群的干預(yù)效應(yīng)研究.pdf

1、大豆甙元是大豆異黃酮(soy isoflavones，SI)的主要種類之一，其在某些人群的腸道內(nèi)，可以在微生物的作用下代謝生成雌馬酚。由于個(gè)體腸道菌群的差異，并不是所有人都可以將大豆甙元代謝為雌馬酚。能夠?qū)⒋蠖惯霸x為雌馬酚的人群稱為雌馬酚代謝陽性者(equol producer, EP+)，反之則稱為雌馬酚代謝陰性者(equolnon-producer，EP-)。有觀點(diǎn)認(rèn)為，SI可能在EP+人群會(huì)產(chǎn)生優(yōu)于EP-人群的健康效應(yīng)。以往研

2、究往往采用SI提取物來評(píng)估雌馬酚代謝表型對(duì)SI健康效應(yīng)的影響。而另外一種主要存在的SI成分——染料木黃酮，可能會(huì)混淆雌馬酚代謝表型對(duì)SI健康效應(yīng)的影響。染料木黃酮并不能在人體內(nèi)代謝產(chǎn)生雌馬酚。然而，單獨(dú)的染料木黃酮干預(yù)可以明顯改善圍絕經(jīng)期綜合癥和絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松，以及促進(jìn)心血管系統(tǒng)健康。因此，無論是在EP+人群或者EP-人群，以染料木黃酮為主的SI提取物的健康效應(yīng)可能主要依賴于染料木黃酮。因此，以往研究對(duì)于雌馬酚代謝表型與SI健康效應(yīng)的關(guān)

3、系的評(píng)估的臨床依據(jù)還存在不足。
　　大量流行病學(xué)研究表明，血液中甘油三酯和低密度脂蛋白膽固醇(low densitylipoprotein cholesterol，LDL-C)濃度升高，高密度脂蛋白膽固醇(high densitylipoprotein cholesterol，HDL-C)濃度降低是心血管疾病(cardiovascular disease，CVD)的重要危險(xiǎn)因素。近十年來，多項(xiàng)系統(tǒng)評(píng)價(jià)和Meta分析評(píng)估了SI對(duì)血脂

4、水平的影響，但結(jié)論卻并不一致。多數(shù)Meta分析表明含SI的大豆分離蛋白具有降低血總膽固醇和LDL-C的作用，而也有Meta分析表明單純的SI干預(yù)對(duì)于血脂沒有影響。SI對(duì)血脂的影響存在爭議的原因除了在于各研究所采用的SI干預(yù)的種類、形式、劑量及時(shí)間不同之外，也可能在于雌馬酚代謝表型的影響。此外，近年來的研究發(fā)現(xiàn)，尿酸也是CVD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，降低尿酸水平可能有助于防治CVD。在我國人群中，EP+人群的血清尿酸水平相比EP-人群較低。

5、>　　為了明確雌馬酚代謝表型與SI健康效應(yīng)的關(guān)系，應(yīng)當(dāng)采用大豆甙元作為SI的唯一來源進(jìn)行臨床干預(yù)試驗(yàn)。本研究以高膽固醇血癥人群為受試者，采用大豆甙元干預(yù)半年，觀察大豆甙元對(duì)CVD危險(xiǎn)因素的影響，并深入探討雌馬酚代謝表型與大豆甙元健康效應(yīng)的關(guān)系。
　　研究對(duì)象與方法
　　(1)本臨床研究中的受試者為輕度和中度的高膽固醇血癥患者，診斷標(biāo)準(zhǔn)為:空腹血清總膽固醇≥5.18 mmol/L(200mg/dl)且＜10.4mmol/L(4

6、00mg/dl)。要求年齡在45-65歲，重慶市常住居民。
　　(2)采用隨機(jī)雙盲對(duì)照試驗(yàn)設(shè)計(jì)。210名受試者（108名男性和102名女性）隨機(jī)分配到大豆分離蛋白（5g/天）不添加大豆甙元組（安慰劑組），或添加40mg大豆甙元組（DAI40組），或80mg大豆甙元組（DAI80組）。干預(yù)時(shí)間為6個(gè)月。該研究由第三軍醫(yī)大學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有受試者均簽署知情同意書。所有試驗(yàn)程序都符合赫爾辛基宣言的規(guī)定。這項(xiàng)試驗(yàn)在中國臨床試驗(yàn)網(wǎng)上注冊(cè)

7、，注冊(cè)號(hào)為CHICTR-TRC-10001048。
　　(3)所有受試者完成3份問卷調(diào)查，包括個(gè)人基本信息、健康狀況和生活方式調(diào)查表，食物頻數(shù)表和3天24小時(shí)膳食記錄表。
　　(4)在試驗(yàn)開始前，受試者連續(xù)3天每天進(jìn)食150克豆腐，然后收集第4天晨尿樣本。用酶降解法從尿液中提取SI及大豆甙元代謝產(chǎn)物，高壓液相色譜法檢測SI及大豆甙元代謝產(chǎn)物。尿液中雌馬酚的濃度高于0.242mg/L（1000 nmol/L）且雌馬酚:大豆甙元

8、的比值進(jìn)行l(wèi)og10轉(zhuǎn)化后的數(shù)值高于-1.75者可以判定為EP+，否則為EP-。
　　(5)血清總膽固醇和甘油三酯采用過氧化物酶法測定，血清LDL-C和HDL-C采用清除法檢測。血清載脂蛋白AⅠ和B采用免疫透射比濁法測定，血清脂蛋白(a)采用免疫比濁法測定。血糖采用葡萄糖氧化酶法測定，血清尿酸濃度用直接酶法測定。血清胰島素用電化學(xué)發(fā)光免疫法測定。全血糖化血紅蛋白用高壓液相親和層析技術(shù)法檢測。
　　(6)所有的統(tǒng)計(jì)分析采用SP

9、SS for Windows軟件。性別和雌馬酚代謝表型等計(jì)數(shù)資料在各組間的差異采用x2檢驗(yàn)。在試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)，3組間計(jì)量資料的差異采用單因素方差分析評(píng)價(jià)。以干預(yù)后改變的差值作為因變量，試驗(yàn)前的數(shù)據(jù)作為協(xié)變量，采用單因素協(xié)方差分析評(píng)估大豆甙元干預(yù)對(duì)心血管危險(xiǎn)因素的影響，多重比較采用Bonferroni方法進(jìn)行。數(shù)據(jù)分別按性別和雌馬酚代謝表型分層后，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。此外，由于分層后樣本量減少，DAI40組和DAI80組的數(shù)據(jù)合并后也進(jìn)行統(tǒng)計(jì)

10、分析。采用雙側(cè)檢驗(yàn)，α水平設(shè)定為0.05。
　　研究結(jié)果
　　(1)177名受試者（91名男性和86名女性）完成了試驗(yàn)。本研究過程中受試者的依從性良好。除DAI80組有1名絕經(jīng)后婦女在干預(yù)后再次來月經(jīng)，所有受試者均無任何嚴(yán)重不良反應(yīng)。三組間在年齡分布、性別構(gòu)成和雌馬酚代謝表型等方面均無明顯差別。
　　(2)干預(yù)前后，三組受試者的日均膳食能量、蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、維生素和礦物質(zhì)攝入水平無明顯差異。由于受試者在研究過

11、程中避免大豆及豆制品的攝入，因此大豆蛋白和異黃酮的攝入量明顯減少。
　　(3)大豆甙元干預(yù)6個(gè)月可明顯降低高膽固醇血癥人群的血清甘油三酯濃度，但不存在劑量-效應(yīng)關(guān)系。干預(yù)6個(gè)月時(shí)，相比安慰劑組，DAI40組和DAI80組受試者的血清甘油三酯濃度分別降低了0.15±0.62和0.24±0.61 mmol/L(P=0.044和0.031)。然而， DAI40組和DAI80組受試者的血清甘油三酯濃度及改變值均沒有明顯差異。在高甘油三酯血

12、癥（血清甘油三酯濃度高于1.71 mmol/L）人群，相比安慰劑組，血清甘油三酯濃度在DAI40組和DAI80組顯著下降了0.62±0.71 mmol/L(n=27)和0.69±0.71 mmol/L(n=21)。
　　(4)相比安慰劑組，DAI80組受試者在干預(yù)6個(gè)月后的血清尿酸濃度明顯降低(P=0.041)。然而，DAI40組與安慰劑組相比，以及DAI40組和DAI80組相比均沒有發(fā)現(xiàn)血清尿酸濃度的改變存在顯著差異。大豆甙元干

13、預(yù)降低血清尿酸濃度的作用不存在劑量-效應(yīng)關(guān)系。
　　(5)大豆甙元干預(yù)不影響血清總膽固醇、HDL-C、LDL-C、載脂蛋白AⅠ和B、脂蛋白(a)、血糖、胰島素和全血糖化血紅蛋白濃度。
　　(6)女性EP+者的比例明顯高于男性。雌馬酚代謝表型對(duì)大豆甙元干預(yù)降低血清甘油三酯和尿酸濃度的作用不明顯。而大豆甙元干預(yù)可使部分個(gè)體的雌馬酚代謝表型發(fā)生轉(zhuǎn)變。
　　結(jié)論
　　(1)每天40mg或80mg的大豆甙元干預(yù)半年可以明顯